中华肿瘤杂志

中华肿瘤杂志2020年第07期

• 全基因组拷贝数变异评分在肺腺癌诊断及预后预测中的价值

  张琳,何磊,李晟磊,杜俊,邸婧,杨丽,刘成龙,尹良玉,成殷,宫玉艳,武旺,刘东戈,王征

  目的 探讨全基因组拷贝数变异(WGCNV)检测和评分系统在肺腺癌诊断和预后预测中的价值。方法 应用显微微切割技术获取76例肺腺癌患者肿瘤组织标本91份和癌旁正常对照组织样本20份，通过全基因组扩增(WGA)富集DNA并构建测序文库，进行二代测序。评估肺腺癌手术和恶性胸水细胞学标本的肿瘤细胞核级别改变，在肿瘤核细胞大小、核分裂象计数、细胞核不典型性和不典型核分裂4个方面进行分级。评价WGCNV评分的预测预后的价值，根据受试者工作特征(ROC)曲线分析WGCNV评分在肺腺癌中的诊断价值。结果 20例癌旁正常肺组织样品WGCNV改变作为正常对照，所有肿瘤标本WGCNV评分为0～9.95分，中位WGCNV评分为2.7分。核级别评分与WGCNV评分之间存在正相关( ＝0.780 90， 4.23分)相对低评分组的风险比为2.07(95% 为0.30～14.12)，中、高评分组风险呈上升趋势。ROC曲线分析显示，当临界值为0.01时，诊断肺腺癌的灵敏度和特异度分别为97.8%和95.0%，阳性预测值(PPV)和阴性预测值(NPV)分别为99.0%和90.1%，ROC曲线下面积(AUC)为0.981，WGCNV评分具有较好的诊断肺腺癌的价值。当临界值为1.8时，鉴别浸润性腺癌与原位腺癌及微浸润性腺癌的灵敏度和特异度分别为78.1%和94.4%，PPV和NPV分别为98.0%和52.0%，AUC为0.896。 结论 WGCNV评分系统在肺腺癌标本中有一定的诊断和预测预后价值。

• 核仁纺锤体相关蛋白1激活AKT/mTOR信号通路促进肺癌进展

  于哲,李晓敏,槐梅,曹珊珊,韩洪涌,毕艳华

  目的 探讨核仁纺锤体相关蛋白1 (NUSAP1)在肺癌中的作用及其相关机制。方法 利用小RNA干扰技术敲低肺癌细胞系A549中NUSAP1的表达。采用CCK－8、Transwell法和流式细胞术检测细胞增殖、迁移和侵袭以及细胞凋亡的情况，采用Western blot检测凋亡相关基因和AKT/mTOR信号通路相关蛋白。结果 与阴性对照组比较，敲低NUSAP1表达后，A549细胞的吸光度( )值降低(分别为1.724±0.067和0.610±0.058， <0.05)，细胞迁移数降低[分别为(272.464±36.232)个和(178.267±14.780)个， <0.05]，细胞侵袭数目降低[分别为(120.585±13.235)个和(73.527±6.617)个， <0.05]，而细胞凋亡率明显增加[分别为(3.572±0.214)%和(11.358±1.047)%， <0.05]，抗凋亡蛋白Bcl－2表达量下降，凋亡相关蛋白Bax和active caspase3表达量上升(均 <0.05)。同时，干扰NUSAP1表达后，A549细胞中AKT和mTOR的磷酸化水平受到显著抑制，细胞增殖相关蛋白P70表达水平降低(均 <0.05)。 结论 敲低NUSAP1的表达，通过抑制AKT/mTOR信号通路抑制肺癌细胞的增殖、迁移和侵袭，促进肿瘤细胞凋亡，进而发挥抑制肺癌的作用。

• miR－141－3p对胃癌细胞增殖迁移及核转录因子κB信号通路的影响

  王飞,杨继鑫,陈智年

  目的 探讨miR－141－3p对胃癌细胞增殖和迁移及核转录因子κB(NF－κB)信号通路的影响。方法 培养人胃癌细胞株BGC－823，采用脂质体转染技术将miR－141－3p模拟物(miR－141－3p mimics)转染至BGC－823细胞构建miR－141－3p过表达的BGC－823细胞株。实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT－PCR)检测转染效果，噻唑蓝比色法检测miR－141－3p对BGC－823细胞增殖的影响，Transwell实验检测miR－141－3p对BGC－823细胞迁移的影响，Western blot法检测NF－κB信号通路相关NF－κB p65、p－IKK－α和p－IKB－α蛋白的表达情况。结果 与对照组和阴性对照组比较，miR－141－3p组BGC－823细胞中miR－141－3p的表达水平为2.39±0.27，高于对照组(1.00±0.09)和阴性对照组(1.01±0.10)，差异均有统计学意义(均 <0.05)；过表达miR－141－3p后，miR－141－3p组的迁移细胞数为(47.64±5.65)个，低于对照组[(106.22±12.14)个]和阴性对照组[(110.40±12.26)个]，差异均有统计学意义(均 <0.05)；BGC－823细胞中NF－κB p65、p－IKK－α和p－IKB－α蛋白的表达水平下调( <0.05)。 结论 miR－141－3p可抑制人胃癌BGC－823细胞的增殖和迁移，其作用机制可能与抑制NF－κB信号通路的激活有关。

• miR－451靶向调控c－Myc抑制多发性骨髓瘤RPMI－8226细胞的增殖侵袭和迁移

  鹿军,门丽杰,李弹弹,孙玲,吴希锋

  目的 探讨miR－451对多发性骨髓瘤RPMI－8226细胞增殖、侵袭和迁移的影响及其作用机制。方法 将体外培养的RPMI－8226细胞分为空白对照组(未转染)、阴性对照组(转染miR－451模拟物阴性对照)和miR－451组(转染miR－451模拟物)，采用实时定量PCR检测各组细胞中miR－451的表达，采用四甲基偶氮唑蓝法和克隆形成实验检测细胞的增殖情况，Transwell小室实验检测细胞的侵袭和迁移情况，Western blot检测c－Myc、基质金属蛋白酶2(MMP－2)和MMP－9蛋白的表达，双荧光素酶报告基因实验检测miR－451和c－Myc的靶向关系。结果 miR－451组和空白对照组细胞中miR－451的表达水平分别为2.85±0.27和1.02±0.06，细胞存活率分别为(47.28±3.15)%和(93.65±6.52)%，克隆形成率分别为(15.03±1.34)%和(28.48±2.12)%，侵袭细胞数分别为(86.65±5.58)个和(135.47±9.85)个，迁移细胞数分别为(106.36±6.48 )个和(165.28±11.05)个，c－Myc蛋白的表达水平分别为0.35±0.03和0.66±0.05，MMP－2蛋白的表达水平分别为0.20±0.02和0.48±0.03，MMP－9蛋白的表达水平分别为0.28±0.03和0.59±0.06，差异均有统计学意义(均 0.05)。双荧光素酶报告基因实验显示，c－Myc为miR－451的潜在靶基因。 结论 miR－451可通过靶向c－Myc抑制RPMI－8226细胞的增殖、侵袭和迁移。

• miR-148b-3p通过调控Wnt信号通路对胶质瘤细胞侵袭和迁移的影响

  许辉,沈杰,谢兰军

  目的 探讨miR-148b-3p对胶质瘤细胞侵袭和迁移的影响及其作用机制。方法 体外培养人胶质瘤U251细胞株，采用Lipofectamine 2000转染试剂将miR-148b-3p模拟物或阴性对照转染至U251细胞，分别记为miR-148b-3p组和阴性对照组，同时设置空白对照组。实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测转染效果，Transwell实验检测各组U251细胞的侵袭能力，划痕实验检测各组U251细胞的迁移能力，酶联免疫吸附试验检测细胞上清液中基质金属蛋白酶2(MMP-2)和MMP-9的水平，Western blot法检测细胞中Wnt信号通路相关蛋白的表达。结果 qRT-PCR显示，miR-148b-3p组U251细胞中miR-148b-3p的表达水平为2.45±0.25，高于阴性对照组(0.97±0.10)和空白对照组(1.00±0.11)，差异均有统计学意义(均 <0.05)。Transwell实验显示，miR-148b-3p组侵袭细胞数为(50.62±5.36)个，与阴性对照组[(108.84±10.14)个]和空白对照组[(113.40±10.06)个]比较，差异均有统计学意义(均 <0.05)。划痕实验结果显示，miR-148b-3p组细胞的迁移率为(23.19±2.50)%，与阴性对照组[(51.81±5.25)%]和空白对照组[(52.06±5.33)%]比较，差异均有统计学意义(均 <0.05)。过表达miR-148b-3p能够抑制MMP-2和MMP-9的表达，下调Wnt1和GSK-3β蛋白的表达。 结论 miR-148b-3p能够通过抑制Wnt信号通路的激活抑制人胶质瘤U251细胞的侵袭和迁移能力。

• 射干苷对卵巢癌SK－OV－3细胞增殖迁移和侵袭的影响

  王丽娟,史惠蓉

  目的 探讨射干苷对卵巢癌SK－OV－3细胞增殖、迁移和侵袭的影响及其作用机制。方法 采用CCK－8法检测0、5、10、50、100 μg/L射干苷对SK－OV－3细胞增殖能力的影响，采用细胞划痕实验和Transwell实验检测细胞的迁移和侵袭能力，采用Western blot检测不同浓度射干苷对磷脂酰肌醇－3激酶(PI3K)/丝苏氨酸蛋白激酶(AKT)信号通路蛋白表达的影响。结果 5、10、50、100 μg/L射干苷组细胞的吸光度( )值分别为0.725±0.036、0.611±0.032、0.410±0.027和0.321±0.023，与0 μg/L射干苷组(0.857±0.043)比较，差异均有统计学意义(均 <0.05)。5、10、50、100 μg/L射干苷组细胞的相对迁移距离分别为0.896±0.092、0.644±0.075、0.432±0.056和0.215±0.043，与0 μg/L射干苷组(1.000±0.083)比较，差异均有统计学意义(均 <0.05)。5、10、50、100 μg/L射干苷组细胞的侵袭数分别为(93.241±10.251)个、(74.258±7.963)个、(40.236±5.210)个和(32.147±3.458)个，与0 μg/L射干苷组[(106.258±11.785)个]比较，差异均有统计学意义(均 <0.05)。5、10、50、100 μg/L射干苷组细胞中磷酸化PI3K(p－PI3K)蛋白的表达水平分别为0.875±0.089、0.727±0.075、0.452±0.053和0.365±0.052，与0 μg/L射干苷组(1.000±0.079)比较，差异均有统计学意义(均 <0.05)。5、10、50、100 μg/L射干苷组细胞中磷酸化AKT(p－AKT)蛋白的表达水平分别为0.816±0.072、0.635±0.079、0.463±0.065和0.305±0.047，与0 μg/L射干苷组(1.000±0.070)比较，差异均有统计学意义(均 <0.05)。LY294002组和对照组细胞的 值分别为0.494±0.0381和0.873±0.08，差异有统计学意义( <0.05)。LY294002组和对照组细胞的相对迁移距离分别为0.523±0.051和1.000±0.081，差异有统计学意义( <0.05)。LY294002组和对照组细胞的侵袭数分别为(61.243±9.251)个和(106.228±11.783)个，差异有统计学意义( <0.05)。LY294002组和对照组细胞中p－PI3K蛋白的表达水平分别为0.521±0.046和1.000±0.075，差异有统计学意义( <0.05)。LY294002组和对照组细胞中p－AKT蛋白水平分别为0.465±0.051和1.000±0.070，差异有统计学意义( <0.05)。 结论 射干苷可通过调控PI3K/AKT信号通路抑制SK－OV－3细胞的增殖、迁移和侵袭能力。

• 28例小儿胸膜肺母细胞瘤的临床病理特征及预后

  汪凤华,梁建华,李乐,唐决,王会,曾嘉航,刘威

  目的 探讨小儿胸膜肺母细胞瘤的临床病理特征、治疗方法和预后。方法 回顾性分析2008年11月至2018年5月广州市妇女儿童医疗中心胸外科收治的28例胸膜肺母细胞瘤患者的临床病理特征。28例患者中，男18例，女10例；年龄22 d至5岁10个月，平均年龄2岁6个月。结果 28例患者中，行活检术1例；手术治疗27例，其中14例Ⅱ、Ⅲ型胸膜肺母细胞瘤术后接受化疗。Ⅰ型胸膜肺母细胞瘤5例，Ⅱ型胸膜肺母细胞瘤5例，Ⅲ型胸膜肺母细胞瘤18例。24例患者获得有效随访，其中，无瘤生存15例；3例接受化疗患儿分别在术后6、10、18个月复发；1例接受化疗患儿在术后11个月出现髂骨转移；2例未接受化疗患儿分别在术后2个月出现肿瘤复发、3个月出现右胫骨及左肾转移；3例自动出院患儿均在出院后1个月内死亡。结论 胸膜肺母细胞瘤恶性程度高，进展快，Ⅰ型胸膜肺母细胞瘤预后较好，Ⅱ、Ⅲ型胸膜肺母细胞瘤预后较差，术后化疗可能提高患儿的生存率。

• 乳腺癌首次足疗程化疗后血糖血脂代谢状况的临床分析

  孙晓莹,马飞,田朋飞,李晓爽,朱爱华,王津京,刘斌亮

  目的 探讨乳腺癌患者首次接受足疗程化疗前、后血糖和血脂的代谢情况。方法 收集2016年12月至2020年1月于北京市朝阳区桓兴肿瘤医院就诊的首次接受化疗的乳腺癌患者，检测患者化疗前、后的血糖血脂水平，分析血糖和血脂水平的变化情况。结果 1 356例女性乳腺癌患者，化疗前、后中位血糖水平分别为5.2和5.3 mmol/L，差异有统计学意义( <0.05)。患者化疗前、后中位甘油三酯水平分别为1.2和1.6 mmol/L，差异有统计学意义( <0.05)。患者化疗前、后中位小而密低密度脂蛋白水平分别为0.7和0.8 mmol/L，差异有统计学意义( <0.05)。患者化疗前、后中位高密度脂蛋白水平分别为1.3和1.2 mmol/L，差异有统计学意义( <0.05)。是否绝经和体质指数与患者的血糖、甘油三酯、低密度脂蛋白和小而密低密度脂蛋白水平均有关(均 <0.05)。 结论 乳腺癌患者首次足疗程化疗后即可出现血糖血脂代谢异常。关注乳腺癌患者的心血管疾病，有助于综合改善患者的临床获益。

• 卵巢功能抑制对35岁及以下中国乳腺癌患者心理状况的影响

  兰波,姜时雨,李涛,马飞

  目的 分析≤35岁中国乳腺癌患者内分泌治疗中卵巢功能抑制对患者抑郁、焦虑等心理状态的影响。方法 收集2018—2019年就诊于中国医学科学院肿瘤医院乳腺内科门诊且正在接受辅助内分泌治疗的91例乳腺癌术后患者的人口社会学特征、临床病理资料和治疗方案。 采用患者健康问卷抑郁量表(PHQ-9)和广泛性焦虑量表(GAD-7)评估患者的抑郁和焦虑状态。结果 91例患者中，61例正在行含有卵巢功能抑制的内分泌治疗，30例未行卵巢功能抑制治疗。未行卵巢功能抑制的30例患者中，PHQ-9得分≥8分2例，PHQ-9得分<8分28例；GAD-7得分≥10分1例，GAD-7得分<10分29例。行卵巢功能抑制的61例患者中，PHQ-9得分≥8分19例，PHQ-9得分<8分42例；GAD-7得分≥10分8例，GAD-7得分<10分53例。未行卵巢功能抑制组和行卵巢功能抑制组患者的抑郁发生率分别为6.7%和31.1%，差异有统计学意义( ＝0.018)；焦虑发生率分别为3.3%和13.1%，差异无统计学意义( ＝0.174)。多因素分析显示，内分泌治疗和居住状态与患者发生抑郁均有关(均 <0.05)。 结论 在≤35岁中国年轻乳腺癌患者的内分泌治疗中，应用卵巢功能抑制药物可能会造成抑郁症状发生率较高，应重视对这一人群心理状态的评估监测。

• 奥拉帕尼联合帕博利珠单抗二线治疗广泛期小细胞肺癌的疗效和安全性

  吴朝真,张素洁,胡毅

  目的 分析40～80岁广泛期小细胞肺癌(SCLC)患者接受二线奥拉帕尼联合帕博利珠单抗治疗以及帕博利珠单抗单药治疗的疗效和安全性。方法 选取2017年3月至2019年10月就诊于解放军总医院的一线标准化疗方案后进展或复发的SCLC患者21例，联合组接受奥拉帕尼(300 mg口服，每日2次)联合帕博利珠单抗(200 mg静脉滴注，每3周1次)治疗；单药组接受帕博利珠单抗(200 mg静脉滴注，每3周1次)治疗。结果 联合组和单药组患者的客观有效率分别为45.5%和10.0%( ＝0.149)，疾病控制率分别为81.8%和70.0%( ＝0.635)，中位无进展生存时间分别为5.93和3.53个月( ＝0.036)，中位总生存时间分别为10.43和8.43个月( ＝0.063)。联合组和单药组患者的不良反应发生率分别为90.9%和70.0%( ＝0.311)，Ⅲ级及以上不良反应包括骨髓抑制(36.4%和10.0%， ＝0.311)、胃肠道反应(9.1%和10.0%， ＝1.000)和其他免疫相关不良反应(18.2%和30.0%， ＝1.000)。多因素分析显示，转移灶数目( ＝0.006)、铂类敏感性( ＝0.036)和乳酸脱氢酶水平( ＝0.022)为影响患者联合用药疗效的独立因素。 结论 帕博利珠单抗联合奥拉帕尼初步显示较好的疗效，安全性可耐受，或可成为SCLC患者二线治疗方案的选择。

• 甲磺酸阿帕替尼联合多西他赛二线治疗晚期胃癌的临床研究

  杨牡丹,高峻,刘晓玲,杨文慧,卢宏霞

  目的 分析甲磺酸阿帕替尼联合多西他赛治疗一线化疗失败后晚期胃癌患者的近期疗效及安全性。方法 收集2017年3月至2018年5月就诊于山西省肿瘤医院、采用一线化疗方案(非多西他赛或紫杉醇)治疗失败后的23例晚期胃癌患者的临床资料，给予阿帕替尼联合多西他赛治疗，分析患者的近期疗效和安全性。结果 23例患者中，20例患者可评价疗效，其中部分缓解4例，稳定13例，疾病进展3例；客观缓解率为20.0%，疾病控制率为85.0%，中位无进展生存时间为4.5个月。不良反应以高血压、呕吐和乏力为主。结论 阿帕替尼联合多西他赛二线治疗晚期胃癌患者具有生存获益，安全性良好。

• 腹腔镜胃癌根治术对患者免疫功能凝血功能及预后的影响

  谷军保,鲍学斌,马钊

  目的 探讨腹腔镜胃癌根治术对患者免疫功能、凝血功能的影响及其预后影响因素。方法 收集2016年5月至2018年5月就诊于河南省人民医院经腹腔镜胃癌根治术治疗的58例患者(腹腔镜组)和经传统开腹治疗的40例患者(传统组)的临床资料。腹腔镜组患者行腹腔镜胃癌根治术，传统组患者行开腹胃癌根治手术，比较两组患者术前及术后的免疫功能和凝血功能，分析腹腔镜胃癌根治术患者的预后及其影响因素。结果 术后3 d，腹腔镜组CD4 水平、CD4 /CD8 分别为(29.78±3.58)%和1.01±0.18，均高于对照组[分别为(27.23±3.47)%和0.93±0.14]，差异均有统计学意义(均 0.05)。多因素分析显示，淋巴结转移为影响腹腔镜胃癌根治术患者预后的独立影响因素( <0.05)。 结论 腹腔镜胃癌根治术可有效减轻患者术后的免疫功能抑制，但机体易处于高凝状态，淋巴结转移与胃癌患者的预后有关。术前、术后应全面评估患者的病情以制定合理的治疗方案，减少术后并发症的发生。