中华肿瘤杂志

中华肿瘤杂志2020年第10期

• 沉默前B淋巴细胞白血病转录因子基因表达诱导肺癌细胞凋亡及活性氧产生

  姚香萍,彭红星,吴金如

  目的 探讨前B淋巴细胞白血病转录因子(PBX1)基因表达对肺癌细胞凋亡、ROS含量和STAT3信号通路的影响。方法 采用实时荧光定量聚合酶链反应检测肺癌及癌旁组织中PBX1基因的表达水平，分析PBX1基因表达水平与患者临床病理特征的关系。采用Western blot法检测人肺癌A549、SPC-A1、SK-MES-1和H1299细胞株中PBX1蛋白的表达水平。应用脂质体法转染空白对照(空白组)、阴性对照(阴性组)和PBX1小干扰RNA(siPBX1组)至A549细胞，采用流式细胞术检测各组细胞的凋亡率和ROS含量，采用Western blot检测各组细胞中PBX1、STAT3、磷酸化STAT3(p-STAT3)、Bcl-2和survivin蛋白的表达水平。结果 肺癌组织中PBX1信使RNA的表达水平(2.36±0.23)高于癌旁组织(1.02±0.15)，差异有统计学意义( <0.05)。PBX1基因表达水平与肺癌分化程度、淋巴结转移和TNM分期均有关(均 <0.05)。PBX1蛋白在人肺癌A549、SPC-A1、SK-MES-1和H1299细胞中的表达水平分别为0.454±0.038、0.403±0.034、0.311±0.028和0.377±0.035，与人正常肺MRC-5细胞(0.041±0.007)比较，差异均有统计学意义(均 <0.05)。转染PBX1 siRNA的A549细胞中，PBX1蛋白的表达水平(0.082±0.010)低于空白组(0.704±0.065)，差异有统计学意义( <0.05)。siPBX1组细胞的凋亡率和ROS含量分别为(30.78±3.64)%和51.55±5.03，与空白组[分别为(3.92±0.27)%和22.36±1.31]比较，差异均有统计学意义(均 <0.05)。p-STAT3、Bcl-2和survivin蛋白的表达水平分别为0.051±0.006、0.202±0.018和0.068±0.008，与空白组(分别为0.172±0.010、0.425±0.041和0.196±0.021)比较，差异均有统计学意义(均 <0.05)。 结论 抑制PBX1基因的表达可诱导肺癌细胞凋亡，其机制可能与ROS产生和STAT3信号的下调有关。

• 淋巴细胞白血病缺失基因1调控miR-513a-5p和RANBP2通路对肾母细胞瘤细胞增殖凋亡的影响

  赵静丽,赵丽丽,牛文忠,丁显春,张文林

  目的 探讨淋巴细胞白血病缺失基因1(DLEU1)、miR-513a-5p和RANBP2在肾母细胞瘤中的调控作用及机制。方法 采用脂质体法转染pcDNA(pcDNA组)、pcDNA-DLEU1(pcDNA-DLEU1组)、miR-NC(miR-NC组)、miR-513a-5p模拟物(miR-513a-5p组)、pcDNA-RANBP2(pcDNA-RANBP2组)、pcDNA-DLEU1＋miR-NC(pcDNA-DLEU1＋miR-NC组)、pcDNA-DLEU1＋miR-513a-5p(pcDNA-DLEU1＋miR-513a-5p mimics组)、miR-513a-5p＋pcDNA(miR-513a-5p mimics＋pcDNA组)和miR-513a-5p＋pcDNA-RANBP2(miR-513a-5p mimics＋pcDNA-RANBP2组)至肾母细胞瘤GHINK-1细胞中。实时荧光定量逆转录聚合酶链反应检测肾母细胞瘤组织、癌旁组织、正常肾细胞HK2和肾母细胞瘤细胞GHINK-1中DLEU1、miR-513a-5p和RANBP2的表达水平，Western blot检测PCNA、Bcl-2和Bax蛋白的表达水平，细胞计数试剂盒8法检测细胞的存活率，流式细胞术检测细胞的凋亡率，双荧光素酶报告实验检测细胞的荧光素酶活性。结果 DLEU1、miR-513a-5p和RANBP2在癌旁组织中的表达水平分别为1.02±0.08、1.01±0.06和1.00±0.05，与肾母细胞瘤组织(分别为5.16±0.24、0.23±0.02和1.67±0.09)比较，差异均有统计学意义(均 <0.05)；DLEU1、miR-513a-5p和RANBP2在HK2细胞中的表达水平分别为1.00±0.06、1.00±0.08和1.02±0.09，与GHINK-1细胞(分别为3.15±0.21、0.18±0.01和1.54±0.10)比较，差异均有统计学意义(均 <0.05)。过表达DLEU1后，pcDNA组GHINK-1细胞的凋亡率[(12.35±1.12)%]与pcDNA-DLEU1组[(7.35±0.41)%]比较，差异有统计学意义( <0.05)。过表达RANBP2后，pcDNA组GHINK-1细胞的凋亡率[(12.64±1.12)%]与pcDNA-RANBP2组[(8.89±0.48)%]比较，差异有统计学意义( <0.05)。miR-513a-5p组DLEU1-WT和RANBP2-WT细胞的荧光素酶活性分别为0.43±0.04和0.61±0.07，与miR-NC组(分别为1.01±0.06和0.99±0.06)比较，差异均有统计学意义(均 <0.05)。anti-miR-513a-5p组DLEU1-WT和RANBP2-WT细胞的荧光素酶活性分别为1.34±0.11和1.39±0.13，与anti-miR-NC组(分别为0.99±0.07和0.98±0.05)比较，差异均有统计学意义(均 <0.05)。pcDNA-DLEU1＋miR-NC组和pcDNA-DLEU1＋miR-513a-5p组GHINK-1细胞的凋亡率分别为(8.51±0.69)%和(11.34±1.03)%，miR-513a-5p＋pcDNA组和miR-513a-5p＋pcDNA-RANBP2组GHINK-1细胞的凋亡率分别为(15.94±1.00)%和(9.96±0.72)%，差异均有统计学意义(均 <0.05)。 结论 长链非编码RNA DLEU1可促进肾母细胞瘤细胞的增殖，其机制与靶向调控miR-513a-5p和RANBP2功能有关，可为肾母细胞瘤的治疗提供理论支持。

• 靶向血管内皮生长因子受体2的超声造影对裸鼠肝癌皮下移植瘤模型中抗血管生成治疗反应的无创监测价值

  汪玲,陆英慧,王天佑

  目的 探讨靶向血管内皮生长因子受体2(VEGFR-2)的超声造影对裸鼠肝癌皮下移植瘤模型中抗血管生成治疗反应的无创监测价值。方法 将16只裸鼠随机分为对照组和贝伐单抗治疗组(治疗组)，建立皮下移植瘤模型，建模2周后，治疗组小鼠给予0.2 mg贝伐单抗瘤内注射治疗，对照组给予等量生理盐水，每周注射3次，连续治疗2周。采用生物素-亲和素法制备靶向VEGFR-2的超声微泡造影剂，分别于治疗前、治疗7 d和治疗14 d行超声检查，绘制时间-强度曲线(TIC)，定量分析各参数随治疗时间变化的差异。采用免疫组化法检测各组小鼠肿瘤组织中CD31的表达。结果 治疗14 d后，治疗组和对照组裸鼠肿瘤组织的体积分别为(0.247±0.019)mm 和(0.307±0.031)mm ，差异有统计学意义( <0.01)。治疗7 d后，治疗组TIC曲线上升斜率(K )、达峰时间(TTP)和峰值强度(PI)分别为3.77±0.62、(3.82±0.21) s和(24.35±3.34) dB，与对照组[分别为2.93±0.31、(4.47±0.50) s和(30.10±2.35) dB]比较，差异均有统计学意义(均 <0.05)。免疫组化结果显示，小鼠超声造影PI与微血管密度呈正相关( ＝0.898， ＝0.017)。 结论 靶向VEGFR-2超声造影评价贝伐单抗抗肿瘤血管生成的治疗效果与TIC指标中K 、TTP和PI等参数的差异变化有关，靶向VEGFR-2的超声造影对无创监测裸鼠肝癌皮下移植瘤模型具有重要价值。

• 中国早期乳腺癌患者化疗后接受聚乙二醇化重组人粒细胞刺激因子初级预防的成本效果分析

  夏雯,王树森,胡皓,赵绯丽,徐菲,洪若曦,蒋逵葵,袁中玉,史艳侠,赵琨,黄嘉佳,薛聪,毕锡文,陆倩仪,安欣,张靖敏

  目的 评估中国早期乳腺癌女性患者，接受聚乙二醇化重组人粒细胞刺激因子(PEG-rhG-CSF)初级预防与接受重组人粒细胞刺激因子(rhG-CSF)初级预防或无预防的成本-效果。方法 构建2种状态Markov模型，假定队列患者是年龄为45岁的Ⅱ期乳腺癌患者。第1种状态模拟4个周期多西他赛联合环磷酰胺[发热性中性粒细胞减少(FN)风险>20%]化疗的成本和结果，其假设基于文献综述，包括FN发生率[基线(确定敏感性分析范围)，0.29(0.24～0.35)]和相关事件[FN病死率，3.4(2.7～4.1)]。第2种状态模拟长期生存，并与相对剂量强度(RDI)[RDI20%的早期乳腺癌患者采用PEG-rhG-CSF初级预防与rhG-CSF初级预防或无预防相比，PEG-rhG-CSF很可能是一种具有成本-效果的替代方法。

• 早期肿瘤退缩和肿瘤反应深度与曲妥珠单抗联合化疗一线治疗人表皮生长因子受体2阳性晚期胃癌患者疗效及预后的关系

  朱柠,陈佳琦,杨梦园,程怡,袁瑛

  目的 探讨早期肿瘤退缩(ETS)和肿瘤反应深度(DpR)与曲妥珠单抗联合化疗一线治疗人表皮生长因子受体2(HER-2)阳性晚期胃癌患者的疗效及预后的关系。方法 回顾性分析2008年1月1日至2017年12月31日间就诊于浙江大学医学院附属第二医院的23例组织学明确为胃腺癌、影像学证实为转移性胃癌患者的临床病理资料。采用Kaplan-Meier法和Log rank检验进行生存分析，采用Cox回归分析对可能影响患者预后的因素进行分析。结果 23例患者中，客观有效率为43.5%，疾病控制率为82.6%。单因素分析显示，ETS≥20%和ETS<20%患者的中位无进展生存时间(PFS)分别为13.0和4.5个月，差异有统计学意义( <0.001)；ETS≥20%和ETS<20%患者中位总生存时间(OS)分别为26.8和10.1个月，差异有统计学意义( <0.001)。DpR≥15%和DpR<15%患者的中位PFS分别为13.0和4.5个月，差异有统计学意义( ＝0.001)；DpR≥15%和DpR<15%患者的中位OS分别为26.8和9.5个月，差异有统计学意义( <0.001)。多因素分析显示，ETS为影响患者PFS的独立因素( ＝0.030)，肿瘤部位和美国东部肿瘤协作组评分为影响患者OS的独立因素(均 <0.05)。 结论 ETS和DpR可能有效预测曲妥珠单抗联合化疗一线治疗HER-2阳性晚期胃癌的疗效和预后。

• 骨显像剂异常浓聚程度及前列腺癌骨转移预测模型的单中心研究

  程艳,罗丽萍,胡珊,李丽娜,武晨,吴波,王东文

  目的 探讨总前列腺特异性抗原(TPSA)、游离前列腺特异性抗原/总前列腺特异性抗原[RAT(F/T)]和Gleason评分等因素与全身骨平面显像评价前列腺癌(PCa)骨转移之间的关系，以及骨显像剂异常浓聚程度对单发病灶的诊断价值。方法 回顾性分析2018年1月至2019年1月，就诊于山西医科大学第一医院的93例确诊PCa患者的 Tc -亚甲基二膦酸盐( Tc -MDP)全身骨平面显像资料，以全身骨平面显像诊断骨转移，采用logistic回归分析PCa骨转移的相关因素，包括年龄、TPSA、RAT(F/T)和Gleason评分，采用受试者工作特征(ROC)曲线明确TPSA的最佳临界值。利用感兴趣区域技术于平面图像上重复勾画病灶(T)和骨骼以外的本底区域(NT)，计算骨显像剂异常浓聚程度(T-NT)/NT，采用ROC曲线明确其诊断价值。 结果 单因素分析显示，Gleason评分、TPSA和RAT(F/T)均与骨转移有关(均 92.82 ng/ml时，对骨转移诊断价值最佳，灵敏度和特异度分别为77.1%和81.0%。全身骨平面图像共计320个显像剂增高或浓聚灶，其中骨转移组194个，非骨转移组126个；骨转移组(T-NT)/NT为7.11±0.29，非骨转移组为2.69±0.20，当(T-NT)/NT>3.52时，对单发病灶的诊断最佳，灵敏度和特异度分别为86.1%和80.2%。 结论 Gleason评分、RAT(F/T)和TPSA为明确PCa骨转移的重要危险因素，TPSA>92.82 ng/ml时诊断价值最佳；当骨显像剂异常浓聚程度>3.52时，对PCa单发病灶的诊断效能最佳。

• 13例子宫肿瘤锎-252中子腔内放疗后的手术效果

  白萍,布洁,李韧,孙萍,孙慧,孙建衡

  目的 分析子宫肿瘤患者接受锎-252中子腔内和体外放疗后手术结果，评估锎-252中子治疗的价值。方法 对13例接受锎-252中子腔内放疗及体外照射后、局部可疑肿瘤未控制或具有预后不良因素的子宫肿瘤患者，进行手术治疗。12例行筋膜外子宫切除，1例行子宫广泛切除＋淋巴清扫。依据术后病理和随访结果进行疗效评价。结果 9例患者术后宫颈病理组织呈重度放疗反应，无肿瘤残存，生存时间为3～14年，中位生存时间8年；4例术后病理有肿瘤残存，均在1年内死亡。12例患者中，3例阴道伤口延迟愈合。结论 锎-252为较好的近距离放射源，使用锎-252放疗后宫颈组织反应较重，部分患者阴道伤口愈合时间延长。对于接受锎-252中子腔内放疗及体外照射后、局部仍存在可疑肿瘤未控制或具有预后不良因素的子宫肿瘤患者，筋膜外子宫切除术是安全可行的治疗方法。

• 结外NK/T细胞淋巴瘤治疗前正电子发射计算机断层扫描显像中骨髓 F-脱氧葡萄糖摄取形态预测预后的价值

  章莹,周锦,王莉,李建勇,丁重阳

  目的 探讨初诊结外NK/T细胞淋巴瘤(ENKTL)治疗前 F-脱氧葡萄糖( F-FDG)正电子发射计算机断层扫描(PET-CT)显像中骨髓摄取形态预测预后的价值。 方法 回顾性分析63例Ⅱ～Ⅳ期ENKTL患者的临床病理资料，全组患者治疗前均行骨髓活检和 F-FDG PET-CT检查。以正常肝脏组织 F-FDG摄取为标准，将患者分为骨髓 F-FDG摄取增高局灶型、弥漫型和摄取正常型。采用Kaplan-Meier法和log rank检验进行单因素生存分析，多因素生存分析采用Cox比例风险模型。 结果 63例患者中，PET-CT显像中骨髓 F-FDG摄取正常型22例，骨髓 F-FDG摄取增高弥漫型24例，骨髓 F-FDG摄取增高局灶型17例。骨髓活检诊断骨髓浸润阴性55例，阳性8例。63例患者中，复发进展37例，死亡31例。骨髓 F-FDG摄取增高局灶型和正常型患者的3年无进展生存率分别为14.7%和63.6%( ＝0.006)，3年总生存率分别为18.8%和64.8%( ＝0.005)。骨髓 F-FDG摄取增高弥漫型和正常型患者的3年无进展生存率分别为35.3%和63.6%( ＝1.968， ＝0.161)，3年总生存率分别为47.9%和64.8%( ＝0.280)。单因素生存分析结果示，乳酸脱氢酶、EB病毒(EBV)DNA、韩国预后指数、骨髓 F-FDG摄取形态均与患者的无进展生存和总生存有关(均 <0.05)；多因素生存分析结果示，EBV-NDA、骨髓 F-FDG摄取形态为影响患者无进展生存的独立危险因素(均 <0.05)，EBV-DNA是影响患者总生存的独立危险因素( <0.05)。 结论 ENKTL患者治疗前 F-FDG PET-CT显像中骨髓摄取形态对患者预后评估具有一定的价值，骨髓 F-FDG摄取增高局灶型是影响患者无进展生存的独立危险因素。

• 胆管导管内乳头状黏液性肿瘤的临床病理特征和预后

  辛奇,赵鹏程,于小源,周明铭

  目的 探讨胆管导管内乳头状黏液性肿瘤(IPMN-B)的临床病理特征、外科诊疗方式和预后。方法 回顾性分析2014年1月至2018年1月于西安市第三医院和吉林大学第一医院就诊的IPMN-B患者的临床病理资料，生存分析采用Kaplan-Meier法。16例患者中，男10例，女6例，中位年龄57岁。结果 临床表现以黄疸(11例)、上腹部疼痛(12例)和高热寒战(4例)为主；合并胆管结石14例，合并肝脏萎缩2例；肿瘤大小为(2.6±0.7)cm。16例患者病理诊断均为IPMN-B，癌变11例，其中浸润癌5例(神经浸润4例)，无脉管浸润；无浸润6例。16例患者病理类型中，胰胆管型8例，胃型5例，肠型2例，嗜酸细胞型1例。实验室检查可见肝功异常12例，胆红素升高9例，糖类抗原199升高8例，癌胚抗原升高4例；影像学检查可见胆管内肿物9例，胆管扩张14例。全组患者均行手术切除，肝左外叶切除1例，左半肝切除1例，胆管肿物切除＋胆肠吻合12例，胰十二指肠切除2例，均可达到根治性切除。15例患者获得有效随访，死亡4例。患者术后中位复发时间为31个月(95% 为23～39个月)，1、2、3年复发率分别为6.7%、40.0%和73.3%，中位总生存时间为35个月(95% 为23～47个月)，1、2、3年生存率分别为100%、80.0%和53.3%。 结论 IPMN-B是一种罕见的胆道系统肿瘤，早期诊断困难，以手术治疗为主，预后较好。

• 29例直肠乙状结肠印戒细胞癌的临床病理特征和诊疗分析

  周皎琳,赵心怡,林国乐,邱辉忠,肖毅,吴斌,陆君阳,牛备战,孙曦羽,仲光熙

  目的 探讨直肠乙状结肠印戒细胞癌(SRCC)的临床病理特征和诊治疗效。方法 回顾性分析2008—2018年北京协和医院29例直肠乙状结肠SRCC患者的临床资料，分析患者的临床病理学特征、诊治效果和预后。结果 29例患者中，男17例，女12例，年龄为(48.7±14.3)岁。29例行术前结肠镜检查，其中20例(69.0%)呈肠壁环腔增厚表现，9例(31.0%)病变活检曾呈假阴性。在直肠超声和直肠磁共振检查中，误诊为炎性病变分别占25.0%(4/16)和17.6%(3/17)。29例患者中，13例行新辅助放化疗(NCRT)，27例行根治性手术，8例行术后放疗。患者3年总生存率和3年无病生存率分别为54.0%和43.0%。未行NCRT(non-NCRT)组和NCRT组患者的3年总生存率分别为69.2%和46.2%，差异无统计学意义( >0.05)。non-NCRT组和NCRT组患者的3年无病生存率分别为39.2%和45.8%，差异无统计学意义( >0.05)。年龄5 cm为患者总生存时间缩短的独立影响因素(均 <0.05)。 结论 直肠乙状结肠SRCC是罕见而具特殊临床表现的结直肠癌，其发病年龄轻、恶性度高、预后差。应加深对直肠乙状结肠SRCC的认识，关注分子肿瘤学进展，以期改善其诊治疗效。

• 埃克替尼联合放疗治疗儿童鼻咽癌一例

  朱健,丁维军,董琴晖,王微,杨海华

  null 患儿女，10岁，因头痛2个月于2011年8月27日入院。患者2个月前无明显诱因出现持续性头痛，以左颞侧为著，伴左耳鸣，偶有回缩性涕血，无鼻塞、面神经麻痹、复视和听力下降等症状，给予止痛药物治疗无明显缓解。2011年7月25日MRI示，左侧颅底可见大片状异常信号，T1加权像(T1 weighted image, T1WI)呈略高信号，T2加权像呈等信号，左侧颞窝延续到副鼻窦，局部骨质破坏，增强扫描肿块明显强化；左颈部淋巴结肿大；诊断考虑颅底恶性肿瘤伴颈部淋巴结转移。行鼻咽部肿块活检术，病理为鼻咽低分化鳞癌。骨扫描、胸部CT、腹部超声等检查未见明显远处转移征象，分期考虑为cT3N1M0 Ⅲ期。2011年9月2日至2011年10月19日行鼻咽癌根治性放疗[图像引导下调强放射治疗(intensity modulated radiation therapy, IMRT)]，靶区包括鼻咽、颅底、斜坡、咽后淋巴结区域、咽旁间隙、翼腭窝、蝶窦、后组筛窦、鼻腔和上颌窦后1/3以及Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ区颈部淋巴引流区，完成计划肿瘤靶区(planning gross tumor volume, PGTV)，剂量为66 Gy，分30次完成，计划靶区(planning target volume, PTV)1为60 Gy，分30次完成；PTV2为50 Gy，分25次完成。在放疗第1天开始，同步口服盐酸埃克替尼片125 mg，1次/d，靶向治疗增敏，直到放疗结束。在完成15次放疗后，鼻咽部定位CT示，肿瘤较前明显缩小，予以改野，完成25次放疗后，复查定位CT，示肿瘤较前进一步缩小，再次改野。完成30次放疗后，给予瘤床补量3次，常规分割剂量为每次2 Gy，实际PGTV剂量为72 Gy。部分重要组织器官的总照射剂量如下：脑干接受剂量最大值为47.81 Gy；脊髓为45.34 Gy；右侧晶体和左侧晶体分别为8.24 Gy和9.07 Gy；右侧视神经和左侧视神经分别为60.18 Gy和61.83 Gy；垂体平均照射剂量为50.75 Gy；右侧腮腺和左侧腮腺分别为24.63和27.24 Gy，右侧腮腺和左侧放射超过30 Gy的体积分别为24.58%和26.01%。放疗过程中，患者出现放射性皮炎Ⅰ度、放射性口腔黏膜炎Ⅱ度和口腔干燥症Ⅱ度，不良反应均在放疗结束后逐渐好转，未出现恶心、呕吐和颈部皮肤水肿等并发症，未出现严重不良反应。完成放疗后1个月复查MRI，评估为完全缓解。2011年11月19日和2011年12月11日分别行辅助TC方案(紫杉醇150 mg ＋卡铂40 mg)，减量化疗2个周期。后长期于我院门诊随访，末次复查(2018年7月11日)生长激素(growth hormone, GH)为0.17 ng/ml，促卵泡激素(follicle stimulating hormone, FSH)为9.9 ng/ml，促黄体激素(luteinizing hormone，LH)为6.8 ng/ml，催乳素(prolactin，PRL)为8.3 ng/ml，促甲状腺素为2.4 uIU/ml，化验项目均在正常范围内；MRI未见明显的复发征象。患者完成治疗7年后，未出现颅神经损伤、听力下降、颜面部畸形、张口困难、颈部纤维化、记忆力减退、智力下降和生长发育迟缓等远期并发症，目前韦氏儿童智力量表评分、韦氏记忆力量表评分、身高、体重和月经周期正常。