中华肿瘤杂志

中华肿瘤杂志2022年第08期

• 人脑胶质瘤干细胞扩增球体模型的建立及其蛋白质和脂质含量检测

  赵海峰,吴从严,黄霞,王为华,闫可,吴杰,顾栋桦,朱文昱,赵耀东,黄强

  目的 旨在体外建立一种具有自发成球和多向分化潜能的人脑胶质瘤干细胞三维球体扩增模型，并了解其蛋白质和脂质及其次级成分含量，为进一步研究球体的代谢奠定基础。方法 分别将人脑胶质瘤干细胞GSC23和SU3在无血清干细胞培养液中培养，培养约2~3周收集细胞球。在多聚甲醛溶液中固定，脱水，石蜡包埋，切片，免疫组织化学染色检测胶质瘤相关标志蛋白，拉曼成像分析球体组织中的蛋白质和脂质及其次级成分含量。采用单因素方差分析比较大球体组、中球体组、小球体组的蛋白质、脂质和苯丙氨酸含量。结果 两种干细胞均能在培养皿内形成类似实体瘤的干细胞扩增球体。免疫组织化学染色显示，多形性胶质母细胞瘤常见标志蛋白CD133、Nestin、表皮生长因子受体、S100、Olig2、p53、Ki－67、胶质纤维酸性蛋白、vimentin、CXC趋化因子受体4和CD34全部表达。拉曼成像显示，所构建的人脑胶质瘤干细胞扩增球体中含有蛋白质(2 930、1 685和1 586 cm )、脂质(2 845和1 444 cm )、苯丙氨酸(1 003 cm )和酰胺Ⅲ(1 250 cm )，大球体组、中球体组、小球体组的蛋白质、脂质和苯丙氨酸含量差异无统计学意义(均 >0.05)。 结论 体外成功构建了人脑胶质瘤干细胞扩增球体模型，其不仅具有三维实体瘤的外形特征和无限扩增能力，还有稳定储存蛋白质和脂质等肿瘤细胞代谢必备能源的能力，有望作为体外人脑胶质瘤研究的工具。

• SBF2－AS1通过调控miR－1287－5p/FSCN1轴影响胶质瘤细胞的增殖凋亡和放射敏感性

  姜迎海,夏令杰,栗超跃,李海芹

  目的 探讨长链非编码RNA SET结合因子2反义RNA 1(SBF2－AS1)对胶质瘤细胞增殖、凋亡和放射敏感性的影响及作用机制。方法 采用实时荧光定量聚合酶链反应检测正常人脑神经胶质细胞HEB和胶质瘤细胞LN18、SW1088、Hs683中SBF2－AS1、miR－1287－5p和肌成束蛋白1(FSCN1)mRNA的表达水平，Western blot检测细胞中FSCN1蛋白表达水平。以胶质瘤细胞LN18和SW1088为研究对象，分别转染SBF2－AS1小干扰RNA(siRNA)、miR－1287－5p模拟物或FSCN1 siRNA，采用细胞计数试剂盒8法检测细胞增殖，流式细胞仪检测细胞凋亡，克隆形成实验检测细胞放射敏感性，Western blot检测cyclin D1、cleaved－caspase 3和磷酸化组蛋白2A变异体(γ－H2AX)蛋白的表达情况。采用双荧光素酶报告基因实验验证SBF2－AS1与miR－1287－5p、miR－1287－5p与FSCN1的调控关系。结果 与HEB细胞比较，胶质瘤细胞LN18、SW1088和Hs683中SBF2－AS1、FSCN1 mRNA和蛋白表达水平显著升高(均 0.05)。si－SBF2－AS1组LN18和SW1088细胞中miR－1287－5p mRNA的表达水平高于si－NC组(均 <0.05)，pcDNA－SBF2－AS1组LN18和SW1088细胞中miR－1287－5p mRNA的表达水平低于pcDNA－NC组(均 <0.05)。miR－1287－5p组LN18和SW1088细胞中FSCN1蛋白表达水平低于miR－NC组(均 <0.05)，anti－miR－1287－5p组LN18和SW1088细胞中FSCN1蛋白表达水平高于anti－miR－NC组(均 <0.05)。同时下调miR－1287－5p和SBF2－AS1或同时上调FSCN1和下调SBF2－AS1时，LN18和SW1088细胞增殖活性和cyclin D1蛋白表达升高(均 <0.001)，凋亡率和cleaved－caspase 3蛋白表达降低(均 <0.001)，存活分数升高(均 <0.001)，γ－H2AX蛋白表达降低(均 <0.001)。 结论 SBF2－AS1在胶质瘤细胞中呈高表达，下调SBF2－AS1表达通过调控miR－1287－5p/FSCN1轴抑制胶质瘤细胞增殖，促进细胞凋亡，并增强细胞的放射敏感性。

• 三磷酸腺苷结合盒式亚家族C成员8在脑胶质瘤组织中的表达及预后预测价值

  周开甲,刘彦伟,赵征,张鸣,刘伯伟

  目的 探讨脑胶质瘤组织中三磷酸腺苷结合盒式亚家族C成员8(ABCC8) mRNA的表达及其作为预测脑胶质瘤预后评估指标的应用价值。方法 收集中国脑胶质瘤基因组图谱(CGGA)数据库中304例脑胶质瘤患者(研究组)的性别、年龄、组织病理类型、WHO分级、IDH突变、1p/19q缺失、生存时间和ABCC8 mRNA表达水平等数据，采用单因素及多因素Cox回归分析明确脑胶质瘤患者的预后影响因素，并通过癌症基因组图谱(TCGA)数据库的506例脑胶质瘤患者、分子脑肿瘤数据库(REMBRANDT)的271例脑胶质瘤患者进行验证。结果 研究组304例脑胶质瘤组织中ABCC8 mRNA表达量为15.93±1.23。ABCC8 mRNA表达量与患者的年龄、组织病理类型、WHO分级、异柠檬酸脱氢酶(IDH)突变状态、1p/19q缺失状态、WHO分子分级有关(均 <0.01)。ABCC8 mRNA高表达组患者的中位生存时间为85.60个月，明显长于低表达组(14.07个月， <0.001)。单因素Cox回归分析显示，年龄、组织病理类型、WHO分级、IDH突变状态、1p/19q缺失状态、术后放疗、术后化疗及ABCC8 mRNA表达与患者总生存时间有关(均 <0.05)。多因素Cox回归分析显示，WHO分级( ＝3.117，95% ：1.970~4.930)、1p/19q缺失状态( ＝0.285，95% ：0.155~0.526)、术后化疗( ＝0.680，95% ：0.488~0.948)及ABCC8 mRNA表达( ＝0.690，95% ：0.491~0.971)为脑胶质瘤患者生存时间的独立影响因素。在TCGA数据集中，ABCC8 mRNA高表达组患者的中位生存时间为133.70个月，长于低表达组患者(19.60个月， <0.001)。在REMBRANDT数据集中，ABCC8 mRNA高表达组患者中位生存时间为37.93月，长于低表达组患者(15.83个月， <0.001)。 结论 脑胶质瘤组织中ABCC8 mRNA的表达水平与肿瘤恶性程度有关，恶性程度越高，表达越低。ABCC8 mRNA的表达水平是脑胶质瘤患者预后的独立影响因素，ABCC8 mRNA高表达者预后好于低表达者。

• 治疗前系统性全身免疫炎性指标和乳酸脱氢酶对鼻咽癌预后的预测价值

  周凤格,刘丽婷,黄晓东,孙士然,陈雪松,陈秋燕,唐林泉,麦海强,王凯,曲媛,吴润叶,张烨,刘清峰,张江鹄,罗京伟,肖建平,高黎,徐国镇,王静波,易俊林

  目的 探讨治疗前系统性免疫炎性指标(SII)、乳酸脱氢酶(LDH)对非转移性鼻咽癌预后的预测价值。方法 纳入2007年1月至2015年10月就诊于中国医学科学院肿瘤医院和中山大学肿瘤防治中心的非转移性鼻咽癌患者839例，均接受调强放疗(IMRT)为主的治疗。使用X-title软件确定SII和LDH预测鼻咽癌患者5年总生存的最佳界值，分析SII、LDH与临床特征的关系。生存分析采用Kaplan-Meier法，组间生存率的比较采用Log rank检验。生存时间影响因素分析采用单因素及多因素Cox模型回归分析。为排除混杂因素对预后的影响，行倾向性评分匹配(PSM)分析。构建包含N分期、SII、LDH的预后风险分层模型，比较高危组、中危组、低危组患者的预后，采用受试者工作特性(ROC)曲线分析评估其预后预测价值。结果 SII预测鼻咽癌患者5年总生存的最佳界值为447.2×10 /L，LDH的最佳界值为198.9 U/L。高SII组中T3~4期、Ⅲ~ⅣB期患者的比例高于低SII组(均 447.2×10 /L、LDH>198.9 U/L作为危险因素，有0~1个危险因素的患者为低危组，有2个危险因素的患者为中危组，有3个危险因素的患者为高危组。低危组、中危组和高危组患者的5年总生存率分别为86.1%、79.8%和41.2%，5年无进展生存率分别为80.7%、70.2%和33.9%，5年无远处转移生存率分别为88.9%、79.2%和47.5%，3组间差异均有统计学意义(均 <0.001)。低危组、中危组和高危组患者主要的治疗失败模式均为远处转移，高危组远处转移率最高，为83.3%(15/31)。所构建的预后风险分层模型预测鼻咽癌患者5年总生存的ROC曲线下面积为0.610，高于TNM分期(0.609)、SII(0.574)、LDH(0.558)。 结论 非转移性鼻咽癌治疗前血液中SII、LDH与患者预后密切相关，联合SII、LDH和N分期将鼻咽癌患者进行预后风险分层可提高预后预测的准确性。

• 基于MRI特征构建直肠神经内分泌肿瘤病理分级的预测模型

  彭文静,万丽娟,张红梅,邹霜梅,欧阳汉,赵心明,周纯武

  目的 探讨MRI特征对直肠神经内分泌肿瘤(NETs)病理分级的预测价值并构建预测模型。方法 回顾性收集2013年1月至2019年11月在中国医学科学院肿瘤医院经病理证实的直肠NETs患者30例，均行直肠常规MRI平扫、扩散加权成像及动态增强MRI扫描。采用方差分析、Freeman－Halton检验或Kruskal－Wallis 检验比较不同病理分级(G1、G2和G3级)直肠NETs间的临床和MRI特征。对有统计学意义的预测特征行共线性检验，通过逐步回归法移除共线性特征得到最优变量子集后，纳入有序多分类logistic回归分析并建立病理分级预测模型。采用受试者工作特征(ROC)曲线分析评价预测模型对直肠NETs病理分级的预测效能。 结果 30例直肠NETs中，病理分级为G1级13例，G2级7例，G3级10例。G1、G2和G3级直肠NETs的肿瘤最大径、肿瘤边界、生长方式、mr－T分期、mr－N评价、壁外血管侵犯、系膜筋膜状态、T2加权成像信号强度、静脉期强化程度和有无远处转移差异均有统计学意义(均 <0.05)。经共线性检验和逐步回归法分析，获得含mr－T分期和静脉期肿瘤强化程度的最优预测子集，并构建了病理分级预测模型。相对于mr－T4期，mr－T1期肿瘤病理分级为低级别的 ＝43.95( ＝0.034)；相对于静脉期明显强化，低或无强化肿瘤病理分级为低级别的 ＝0.07( ＝0.014)；G1级与G2~3级二分类预测模型的常数项为－1.78，G1~2级与G3级二分类预测模型的常数项为0.90。应用此模型预测G1、G2和G3级直肠NETs的ROC曲线下面积分别为0.945、0.624和0.896，灵敏度分别为75.0%、85.7%和90.9%，特异度分别为88.9%、52.6%和93.3%。 结论 基于mr－T分期和静脉期肿瘤强化程度的预测模型可以在治疗前预测直肠NETs的病理分级。

• 化疗早期最大标准摄取值变化率Deauville评分联合C－myc基因重排对弥漫性大B细胞淋巴瘤的预后预测价值

  原凌,赵铭,苏丽萍,田蓉蓉,薄云峰,林艳梅,郭芳

  目的 探讨化疗早期 F－脱氧葡萄糖(FDG)正电子发射型计算机断层扫描(PET/CT)显像最大标准摄取值变化率(ΔSUVmax%)、Deauville评分和C－myc基因重排对弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)的预后预测价值。 方法 2010年9月至2016年12月山西省肿瘤医院收治的、经病理证实的原发DLBCL患者83例，分别于化疗前1周和化疗早期(34例在化疗1个周期后的17~21 d，49例在化疗2个周期后的17~21 d)行 F－FDG PET/CT扫描。勾画感兴趣区，计算治疗前后ΔSUVmax%。采用Deauville 5分法对患者化疗早期的PET/CT图像进行评分。采用原位荧光杂交检测C－myc基因重排情况。随访时间为36~111个月，研究终点为无进展生存时间(PFS)。采用受试者工作特征(ROC)曲线分析、 检验、Spearman相关分析、Log rank检验、Cox比例风险模型进行统计分析。 结果 83例DLBCL患者中，19例在随访期内进展。化疗早期预测肿瘤进展的最佳界值ΔSUVmax%为62.59%，Deauville评分取5分，两种方法的灵敏度、特异度、准确性差异均无统计学意义(均 >0.05)。化疗早期ΔSUVmax%与Deauville评分、C－myc基因重排均呈负相关( 分别为－0.889和－0.862，均 <0.001)，Deauville评分与C－myc基因重排呈正相关( ＝0.781， <0.001)。ΔSUVmax%≥62.59%组(57例)和<62.59%组(26例)的中位PFS分别为59.0和16.0个月，差异有统计学意义( <0.001)。Deauville评分<5分组(61例)和＝5分组(22例)的中位PFS分别为59.0和15.0个月，两组差异有统计学意义( <0.001)。C－myc基因重排阴性组(62例)和阳性组(21例)的中位PFS分别为59.0和15.0个月，两组差异有统计学意义( <0.001)。ΔSUVmax%<62.59%并Deauvulle评分＝5分组、ΔSUVmax%<62.59%并C－myc基因重排阳性组、Deauville评分＝5分并C－myc基因重排阳性组患者的中位PFS分别为15.5、15.0和13.5个月，明显差于其他亚组(均 <0.001)。 结论 化疗早期ΔSUVmax%、Deauville评分和C－myc基因重排均与DLBCL患者的PFS有关，两两联合对DLBCL的预后有很好的预测价值。

• 晚期非小细胞肺癌液基细胞学标本的分子检测评估和疗效评价

  肖晓悦,赵琳琳,李腾,孙悦,滕菲,王聪,李峻岭,许子宜,郭会芹,赵焕,邱田,邢镨元,张智慧

  目的 探讨液基细胞学标本基因检测在晚期非小细胞肺癌(NSCLC)分子分型及指导临床靶向治疗的应用价值。方法 收集2015年3月至2017年4月中国医学科学院肿瘤医院412例晚期NSCLC患者的液基细胞学标本和临床资料，其中32例患者有手术后组织病理切片或组织活检标本，采用实时荧光定量聚合酶链反应检测表皮生长因子受体(EGFR)、鼠类肉瘤病毒癌基因(KRAS)和鼠类肉瘤过滤性毒菌致癌同源体B(BRAF)基因突变，分析基因突变与临床病理学特征的关系，对液基细胞学标本与组织学标本基因检测结果进行一致性检验。对142例使用EGFR-酪氨酸激酶抑制剂(TKI)药物治疗的患者进行临床疗效评价，生存分析采用Kaplan-Meier法。结果 412例液基细胞学标本中，216例(52.4%)发生EGFR突变，36例(8.7%)发生KRAS基因突变，3例(0.7%)发生BRAF基因突变。EGFR突变与性别、病理类型、标本来源有关，其中女性患者EGFR突变率(63.0%)高于男性患者(40.8%， <0.001)，腺癌EGFR突变率(54.3%)高于非腺癌(0.0%， <0.001)。KRAS突变与性别有关，男性突变率(12.2%)高于女性(5.6%， ＝0.016)。3例多基因共突变均为Ⅳ期男性腺癌患者。32例同时有液基细胞学标本与组织学标本的患者中，30例患者的液基细胞学标本与组织学标本基因检测结果一致( ＝0.91)。12例组织学与液基细胞学标本均来自转移灶，基因检测结果完全一致( ＝1.00)；19例组织学标本来自肺部原发灶、液基细胞学标本来自转移灶，18例基因检测结果一致( ＝0.92)。EGFR基因突变阳性患者临床应用EGFR-TKI治疗的疾病控制率(DCR)为89.0%(89/100)，无进展生存时间(PFS)为13.8个月，均高于EGFR基因突变阴性患者[DCR为30.8%(4/13)，中位PFS为1.4个月，均 <0.01]。 结论 液基细胞学标本与组织学标本的基因检测结果有高度一致性，液基细胞学标本是晚期NSCLC基因检测的重要标本来源。根据液基细胞学标本的基因检测结果进行晚期NSCLC分子分型，并指导EGFR-TKI药物靶向治疗能获得很高的DCR和PFS，具有重要临床价值。

• 胸腔积液在肺腺癌基因检测中的应用研究

  武国栋,谷文光,袁明明,赵军,李生

  目的 探讨采用肺腺癌患者的胸腔积液进行基因检测结果的可靠性，评估胸腔积液上清在肺腺癌基因检测中的临床应用价值。方法 纳入2015年2月至2019年12月经病理确诊为肺腺癌的患者145例，其中来自于北京大学肿瘤医院129例，北京市房山区第一医16例。对其胸腔积液上清样本55例、血浆样本52例、肿瘤组织样本48例，进行常见的1 021个肿瘤相关基因的靶向高通量测序，比较胸腔积液上清与肿瘤组织、血浆的基因突变检出情况。结果 胸腔积液上清肿瘤相关基因的突变检出率为100.00%，中位最大体细胞等位基因频率为16.40%，基因拷贝数变异检出率为45.45%，与肿瘤组织样本(分别为95.56%、26.55%和45.83%)比较，均差异无统计学意义(均 >0.05)；与血浆(分别为90.38%、2.50%和9.62%)比较，差异均有统计学意义(均 0.05)，但高于血浆( <0.05)。 结论 胸腔积液上清在检测基因突变方面具有很高的可靠性和有效性。当肺腺癌患者在临床上难以获取肿瘤组织时，可作为替代样本用于基因检测。

• 超声造影与微血管成像对肾脏肿瘤良恶性鉴别诊断的价值

  王丽,魏雪晴,魏玺,张晟

  目的 比较超声造影(CEUS)和微血管成像(SMI)在肾脏肿瘤良恶性鉴别诊断中的价值。方法 回顾性分析2019年天津医科大学肿瘤医院经手术病理证实的241例肾脏肿瘤患者(恶性肿瘤221例，良性肿瘤20例)的CEUS和SMI图像，分析两种检查方式对肾脏肿瘤良恶性鉴别诊断与病理诊断结果的一致性，采用受试者工作特征(ROC)曲线分析比较两种方式的诊断效能。结果 在CEUS中，肾脏恶性肿瘤主要表现为快进(155例，70.1%)、快退(194例，87.8%)、高增强(181例，81.9%)，肾脏良性肿瘤主要表现为慢进(11例，55.0%)、慢退(9例，45.0%)、低增强(14例，70.0%)，两组的灌注模式、增强程度、消退模式差异均有统计学意义(均 <0.001)。根据CEUS诊断标准，诊断为恶性肿瘤224例，良性肿瘤17例，与病理诊断结果具有中度一致性( ＝0.62， ＝0.581)。在SMI中，肾脏恶性肿瘤的Adler分级主要为2~3级(196例，88.7%)，肾脏良性肿瘤的Adler分级主要为0~1级(18例，90.0%)，差异有统计学意义( <0.001)。根据SMI诊断标准，诊断为恶性肿瘤215例，良性肿瘤26例，与病理诊断结果具有中度一致性( ＝0.57， ＝0.238)。CEUS与SMI诊断肾脏肿瘤良恶性的ROC曲线下面积分别为0.789和0.823，差异无统计学意义( ＝0.711)。 结论 CEUS和SMI对肾脏肿瘤的诊断各有优势，SMI具有简便、无创、价格低廉的优点，可作为诊断肾脏肿瘤的有效方法。

• 哌柏西利联合内分泌药物治疗激素受体阳性人表皮生长因子受体2阴性晚期乳腺癌的真实世界研究

  袁渊,彭颖,胡赛男,钱瑜,张莉莉

  目的 探讨哌柏西利联合内分泌药物治疗激素受体(HR)阳性人表皮生长因子受体2(HER－2)阴性晚期乳腺癌的疗效及安全性。方法 收集2018年10月至2020年11月在江苏省肿瘤医院接受哌柏西利治疗的HR阳性HER－2阴性晚期乳腺癌患者95例，总结其近期疗效、远期疗效及不良反应，主要观察指标为无进展时间(PFS)，次要观察指标为客观缓解率(ORR)、疾病控制率(DCR)、临床获益率(CBR)。采用Log rank检验和Cox比例风险回归模型分析患者PFS的影响因素。结果 95例患者的ORR为29.5%(28/95)，DCR为88.4%(84/95)，CBR为72.6%(69/95)，中位PFS为10.4个月。单因素分析显示，是否内脏转移、哌柏西利治疗线数和内分泌治疗敏感性与接受哌柏西利联合内分泌治疗后患者的PFS有关(均 <0.05)。多因素Cox回归分析显示，是否内脏转移、内分泌治疗敏感性是接受哌柏西利联合内分泌治疗后患者PFS的独立影响因素。与无内脏转移的患者相比，合并内脏转移患者的 为3.118(95% ：1.405~7.236)；与内分泌治疗敏感患者相比，内分泌治疗原发性耐药和继发性耐药患者的 分别为4.455(95% ：1.380~14.385)和1.4566(95% ：0.488~4.346)。主要不良反应为血液学毒性，主要表现为白细胞、中性粒细胞及血小板减少，发生率分别为78.9%(75/95)、85.3%(81/95)和72.6%(69/95)，3~4级发生率分别为27.4%(26/95)、51.6%(49/95)和20.0%(19/95)。 结论 哌柏西利联合内分泌药物治疗HR阳性HER－2阴性晚期乳腺癌取得了良好的疗效，不良反应可控。

• 合并结直肠恶性肿瘤的多原发恶性肿瘤临床流行病学特点及病理特征分析

  乐晨琴,周欣毅,杨琦,宋瑶姿,肖乾,丁克峰

  目的 探讨合并结直肠恶性肿瘤的多原发恶性肿瘤(MPMTs)的流行病学特点及临床病理特征。方法 筛选2013年1月至2019年12月浙江大学医学院附属第二医院收治的合并结直肠恶性肿瘤MPMTs患者，收集患者的性别、年龄、发病间期、病灶分布、TNM分期、病理类型等信息，分析其流行病学特点和临床病理特征。结果 共收治合并结直肠恶性肿瘤的MPMTs患者235例，占同期5 878例结直肠恶性肿瘤患者的4.00%。其中男154例，女81例，男女之比为1.90∶1，第一原发癌的中位诊断年龄为64岁。同时性多原发癌(SC)患者90例(38.30%)，异时性多原发癌(MC)患者145例(61.70%)，SC患者第一原发癌诊断年龄大于MC患者(分别为65和62岁， ＝0.022)。中位发病间期为13.25个月(95% ：19.61~27.23个月)，第一原发癌诊断年龄与发病间期呈负相关( ＝－0.224， 0.05)。肠外病灶共234个，主要分布于肺(48个)、胃(45个)、肝胆(25个)。SC患者位于胃的肠外病灶占比为32.18%(28/87)，高于MC患者[11.56%(17/147)， <0.001]；位于甲状腺的肠外病灶占比为2.30%(2/87)，低于MC患者[10.20%(15/147)， ＝0.024]。 结论 约有4%的结直肠恶性肿瘤患者罹患2种及以上恶性肿瘤，男性略多于女性，MC患者略多于SC患者。第一、第二原发恶性肿瘤诊断年龄均主要集中在55~75岁，发病间期与第一原发恶性肿瘤诊断年龄成反比。SC、MC患者的结直肠恶性肿瘤病灶在所有肠段均有分布，病理分期以Ⅱ、Ⅲ期为主，病理类型以腺癌为主，肠外病灶多位于肺和胃。