中华肿瘤杂志

中华肿瘤杂志2023年第01期

• 人脐带间充质干细胞来源的外泌体通过miRNAs促进胰腺癌细胞生长

  丁乙轩,王宇婷,梅文通,郑智,曲元旭,梁阔,李嘉,曹锋,李非

  目的 探讨人脐带间充质干细胞来源的外泌体(hucMSCs-exo)对胰腺癌细胞增殖、侵袭的影响及其分子机制。方法 hucMSCs-exo来自首都医科大学宣武医院顺利分娩后的产妇(3例，脐带长约20 cm)，将hucMSCs-exo分别加入胰腺癌细胞BxPC3和Panc-1中，采用细胞计数试剂盒8(CCK-8)法和Transwell实验检测BxPC3和Panc-1细胞的增殖和侵袭能力。小鼠皮下接种人胰腺癌Panc-1细胞(1×10 个)，hucMSCs-exo组小鼠直接于肿瘤内注射hucMSCs-exo，对照组注射磷酸盐缓冲液，测量小鼠模型肿瘤的体积及重量。采用高通量测序方法检测外泌体中miRNAs的表达，通过基因本体论(GO)和京都基因与基因组百科全书(KEGG)分析高表达miRNAs的靶基因相关功能以及主要代谢通路。 结果 CCK-8实验显示，hucMSCs-exo组BxPC3和Panc-1细胞吸光度值分别为4.68±0.09和5.20±0.20，高于Control组(分别为3.68±0.01和3.45±0.17，均 <0.05)。Transwell实验显示，hucMSCs-exo组BxPC3和Panc-1细胞侵袭数分别为(129.40±6.02)个和(134.40±7.02)个，高于Control组[分别为(89.40±4.39)个和(97.00±6.08)个，均 <0.05]。hucMSCs-exo组肿瘤体积[(884.57±59.70)mm ]和肿瘤质量[(0.94±0.21)g]均高于Control组[分别为(695.09±57.81)mm 和(0.60±0.13)g，均 <0.05]。高通量测序结果显示，hucMSCs-exo中miR-148a-3p、miR-100-5p、miR-143-3p、miR-21-5p和miR-92a-3p呈高表达，GO以及KEGG分析结果显示，高表达miRNAs的靶基因主要参与调节细胞葡萄糖醛酸化，主要代谢通路是抗坏血酸和醛酸代谢。 结论 hucMSCs-exo可促进胰腺癌细胞的生长，其机制与外泌体中高表达的miRNAs相关。

• 尿路上皮癌相关1基因靶向miR-204-5p对子宫内膜癌细胞增殖迁移凋亡和免疫逃逸的影响

  靖爽,冯燕,和晓利,王悦

  目的 探讨长链非编码RNA尿路上皮癌相关1(UCA1)基因对子宫内膜癌细胞增殖、迁移、凋亡和免疫逃逸的影响及其分子机制。方法 收集2017—2019年于河南省人民医院行子宫全部或部分切除的内膜样腺癌患者的子宫内膜癌组织和癌旁正常组织。采用实时荧光定量聚合酶链反应检测UCA1和miR-204-5p的表达，采用细胞计数试剂盒8法、Transwell法、流式细胞术检测细胞增殖迁移和凋亡能力，双荧光素酶报告分析UCA1与miR-204-5p的靶关系。将HEC-1A-sh-NC或HEC-1A-sh-UCA1细胞与外周血单核细胞(PBMC)或细胞因子诱导的杀伤细胞进行体外共培养，探讨UCA1在免疫逃逸中的作用。结果 子宫内膜癌组织中UCA1的表达水平(17.08±0.84)高于癌旁正常子宫内膜组织(3.00±0.37)，miR-204-5p的表达水平(0.98±0.16)低于癌旁正常子宫内膜组织(2.00±0.20，均 <0.05)。Pearson相关性分析显示，miR-204-5p的表达与UCA1的表达呈负相关( ＝－0.330， ＝0.030)。UCA1和miR-204-5p的表达与子宫内膜癌国际妇产科联盟分期、淋巴结转移及血管浸润有关(均 <0.05)。sh-UCA1组细胞的吸光度( )值(0.58±0.11)和细胞迁移数[(199.68±18.44)个]均低于sh-NC组[分别为1.24±0.17和(374.76±24.83)个]，sh-UCA1组细胞凋亡率[(28.64±7.80)%]高于sh-NC组[(14.27±4.38)%，均 <0.05]。效应细胞和靶细胞不同比例培养后，HEC-1A-sh-UCA1组细胞存活率均低于HEC-1A-sh-NC组，差异均有统计学意义(均 <0.05)。UCA1存在与miR-204-5p结合的位点。UCA1+anti-miR-204-5p组细胞的 值(1.74±0.08)和细胞迁移数[(426.00±18.00)个]均高于对照组[分别为1.00±0.03和(284.00±8.00)个]，UCA1+anti-miR-204-5p组细胞凋亡率[(5.42±0.93)%]低于Control组[(14.82±1.48)%，均 <0.05]。当与PBMC共培养时，HEC-1A-sh-UCA1细胞可以诱导更高的干扰素γ(IFN-γ)表达，PHA组及PHA+pre-miR-204-5p组细胞中IFN-γ的表达水平分别为2.42±0.49和1.88±0.26，均高于PHA+pre-NC组(0.85±0.10，均 <0.05)。体外与细胞因子诱导的杀伤细胞(不同比例)共培养时，HEC-1A-sh-UCA1细胞则具有较低的存活率，HEC-1A-pre-miR-204-5p组细胞存活率均低于HEC-1A-pre-NC组，差异均有统计学意义(均 <0.05)。 结论 UCA1/miR-204-5p可能在人子宫内膜癌中发挥重要作用。

• 蛋白酶活化受体2在卵巢上皮性癌中的表达及意义

  刘双环,马怡茗,张亚男,赵新华,汪红英,李斌

  目的 探讨蛋白酶活化受体2(PAR2)在卵巢上皮性癌中的表达及意义。方法 收集癌症基因组图谱(TCGA)数据库(410例卵巢上皮性癌患者)和组织基因型表达(GTEx)数据库(88例正常人)中PAR2 mRNA的表达水平。收集2009—2019年于中国医学科学院肿瘤医院接受手术治疗卵巢癌患者(149例)的癌组织及临床病理资料，对患者肿瘤组织进行PAR2蛋白免疫组化染色，分析PAR2 mRNA及蛋白表达与临床病理特征及预后的关系，通过富集分析研究PAR2参与的基因功能及相关信号通路。生存分析采用Kaplan-Meier法和Log rank检验，影响因素分析采用Cox比例风险回归模型。结果 TCGA和GTEx数据库结果显示，卵巢上皮性癌组织中PAR2 mRNA的表达水平(3.05±0.72)高于正常卵巢组织(0.33±0.16， ＝0.004)。149例患者的免疫组化结果显示，PAR2呈强阳性19例，阳性77例，弱阳性21例，阴性32例。初始手术减瘤效果及初始治疗效果与PAR2 mRNA及PAR2蛋白的表达有关(均 <0.05)。PAR2 mRNA高表达组(PAR2 mRNA≥0.88)患者的中位无进展生存时间(14.9个月)低于低表达组(PAR2 mRNA<0.88；17.1个月， ＝0.033)；PAR2 mRNA高表达组患者的中位总生存时间(36个月)低于低表达组(40个月， ＝0.011)。多因素分析显示，初始手术减瘤效果、初始治疗效果是无进展生存和总生存的独立影响因素(均 <0.05)。PAR2蛋白高表达组(PAR2≥0.90)患者的中位无进展生存时间(6.5个月)低于PAR2蛋白低表达组(PAR2<0.90；9.5个月， ＝0.016)。PAR2高表达组患者的中位总生存时间(43个月)低于低表达组(55个月， ＝0.038)。多因素分析显示，PAR2蛋白表达水平、初始手术减瘤效果、化疗耐药是无进展生存和总生存的独立影响因素(均 <0.05)。基因本体论(GO)及京都基因与基因组百科全书(KEGG)分析显示，PAR2的靶基因主要富集于细胞间连接相关的功能上，占40.0%(6/15)。基因富集分析表明，在PAR2 mRNA高表达卵巢癌患者中Wnt/β-catenin信号通路( ＝0.023)、MAPK通路( ＝0.029)及糖酵解相关通路( ＝0.018)存在富集。 结论 PAR2表达与卵巢癌初始手术满意减瘤、初始治疗效果及患者预后有关，PAR2可能参与Wnt/β-catenin信号通路调控细胞间连接来促进卵巢癌侵袭及转移。

• 不同治疗方案针对晚期或不可切除血管肉瘤的单中心研究

  彭瑞清,徐步舒,刘园园,杨倩琼,潘求忠,张星

  目的 评价不同内科方案治疗晚期或不可切除血管肉瘤的有效性和安全性。方法 采用单中心回顾性研究方法，选取2005年1月至2020年8月于中山大学肿瘤防治中心治疗的晚期或不可切除的血管肉瘤患者55例，其中接受以阿霉素为主的一线联合化疗(阿霉素组)34例，接受阿霉素或脂质体阿霉素联合紫杉醇或白蛋白结合型紫杉醇方案一线化疗(联合组)12例，接受紫杉醇为主的一线化疗(紫杉醇组)4例，接受抗血管生成靶向治疗6例，接受程序性死亡受体1(PD－1)抗体联合抗血管生成靶向治疗2例。靶向和免疫联合靶向治疗包括5例一线治疗及3例二线治疗。采用实体瘤的疗效评价标准1.1标准评价疗效，药物不良反应根据常见不良反应事件评价标准4.0版本评价。生存分析采用Kaplan－Meier法和Log rank检验，影响因素分析采用Cox比例风险回归模型。结果 阿霉素组34例患者中部分缓解(PR)18例，中位无进展生存时间(PFS)为4.5个月，中位总生存时间(OS)为15个月。联合组12例患者中PR 4例，中位PFS为4个月，中位OS为19个月。紫杉醇组4例患者中PR 2例，中位PFS为3个月，中位OS为9个月。抗血管生成靶向治疗6例患者中PR 1例，中位PFS为3个月，中位OS为16个月；2例PD－1抗体联合培唑帕尼或安罗替尼的患者均取得PR，PFS分别为17个月和>16个月。原发于肺、肝、脾血管肉瘤患者的中位PFS(7.5个月)优于其他原发部位患者(3.0个月， ＝0.028)，女性血管肉瘤患者的中位OS(20个月)优于男性患者(12个月， ＝0.045)。肿瘤原发部位、性别、年龄及治疗方案均不是血管肉瘤患者预后的独立影响因素(均 >0.05)。联合组出现3~4级心脏不良反应2例。 结论 以蒽环类或以紫杉类为主的化疗在晚期血管肉瘤中仍是主导地位，抗血管生成靶向药物联合PD－1抗体在部分血管肉瘤中可见一定疗效，疗效维持时间长，且不良反应可控。

• 甲状腺髓样癌上纵隔淋巴结转移的临床病理特征

  何雨沁,陈雨涛,王健,陈默启,朱一鸣,倪松,刘绍严

  目的 探讨甲状腺髓样癌上纵隔淋巴结转移(sMLNM)的临床病理特征。方法 回顾性分析2012年5月至2021年1月于中国医学科学院肿瘤医院就诊的因影像学怀疑sMLNM而行手术治疗的甲状腺髓样癌患者的临床病理资料。根据术后病理结果将患者分成sMLNM组和无sMLNM组。收集患者的临床病理特征、术前术后降钙素(Ctn)和癌胚抗原(CEA)水平。影响因素分析采用logistic回归分析，采用绘制受试者工作特征(ROC)曲线确定术前Ctn和术前CEA预测sMLNM的最佳临界值。结果 94例患者中，sMLNM组69例，无sMLNM组25例。术前Ctn水平( ＝0.003)、术前CEA水平( ＝0.010)、远处转移( ＝0.022)、淋巴结被膜外侵犯( ＝0.013)、中央区淋巴结转移数( ＝0.002)与sMLNM有关。多因素分析未发现与sMLNM有关的独立危险因素。术前Ctn预测sMLNM最佳临界值为1 500 pg/ml，曲线下面积为0.759(95% ：0.646~0.872)，术前Ctn诊断sMLNM的敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值分别为61.2%、77.3%、89.1%和39.5%。胸骨劈开患者淋巴结转移率由高到低分别为2R区(82.4%，28/34)、2L区(58.8%，20/34)、4R区(58.8%，20/34)、3区(23.5%，8/34)、4L区(11.8%，4/34)。41例(43.6%，41/94)患者出现术后并发症，无围手术期死亡患者。14.8%(12/81)的患者术后1个月Ctn≤12 pg/ml，其中sMLNM患者5例。 结论 对于影像学高度可疑的sMLNM，联合术前Ctn诊断具有一定的临床指导意义，尤其是对于术前Ctn>1 500 pg/ml的患者；首次胸骨劈开术式清扫上纵隔淋巴结至少应包括上纵隔2~4区，以免残留病灶；手术的抉择和执行均需谨慎对待，虽然sMLNM患者术后达到生化治愈的概率低，但依然近41.7%的患者能在生化水平上从手术方案中获益。

• 紫杉醇脂质体在晚期乳腺癌中应用的真实世界研究

  孙春晓,王树森,李健斌,王永胜,欧阳取长,杨谨,王海波,王晓稼,陈文艳,袁芃,闫敏,江泽飞,殷咏梅

  目的 探讨真实世界中紫杉醇脂质体在中国人群晚期乳腺癌中的应用情况及疗效。方法 本研究为回顾性研究，收集中国11家医院2016年1月1日至2019年8月31日接受紫杉醇脂质体解救治疗的晚期乳腺癌患者的临床病理资料。研究主要观察指标为无进展生存时间(PFS)，次要观察指标为客观缓解率(ORR)及安全性。生存分析采用Kaplan－Meier法，单因素分析采用Log rank检验，多因素分析采用Cox比例风险模型。结果 647例接受紫杉醇脂质体解救治疗的晚期乳腺癌患者中，一线治疗占比为43.3%(280/647)，二线治疗占比为27.7%(179/647)，三线及以上治疗占比为29.1%(188/647)。一线和二线治疗每周期中位总剂量均为260 mg，三线及以上治疗中位总剂量为240 mg。治疗中位周期数为6个周期，单药治疗中位周期数为4个周期，联合化疗或联合靶向药物治疗中位周期数为6个周期。全组647例患者中，采用紫杉醇脂质体联合卡培他滨±曲妥珠单抗方案治疗167例(25.8%)，采用紫杉醇脂质体单药方案治疗123例(19.0%)，采用紫杉醇脂质体联合铂类药物±曲妥珠单抗方案治疗119例(18.4%)，采用紫杉醇脂质体联合曲妥珠单抗±帕妥珠单抗方案治疗108例(16.7%)。一线治疗和二线治疗患者的中位PFS(分别为5.5和5.5个月)长于三线及以上治疗的患者(4.9个月，均 <0.05)；一线、二线、三线及以上治疗患者的ORR分别为46.7%、36.8%和28.2%。多因素分析显示，无事件生存时间和治疗线数是PFS的独立影响因素(均 <0.05)。患者常见不良反应为骨髓抑制、消化道反应、手足综合征、肝功能异常。 结论 紫杉醇脂质体在各类分子分型乳腺癌中广泛应用，有效且安全性良好。

• 安罗替尼联合伊立替康用于转移性结直肠癌患者二线治疗的Ⅰ/Ⅱ期多中心临床研究

  张博,王玺,朱陵君,朱蔚友,李群,柳韵,祁玲,束永前,黄镜

  目的 探讨安罗替尼联合伊立替康用于转移性结直肠癌患者二线治疗的安全性和疗效。方法 研究为前瞻性Ⅰ/Ⅱ期临床研究，在中国医学科学院肿瘤医院和江苏省人民医院开展。研究入组经一线治疗失败且未接受过伊立替康治疗的晚期结直肠癌患者，给予安罗替尼联合伊立替康治疗。研究分Ⅰ期和Ⅱ期两部分。Ⅰ期阶段，伊立替康采用固定剂量(180 mg/m 静脉输注，每2周重复)，安罗替尼进行剂量递增(8、10和12 mg每日1次口服，连续2周停药1周，每3周重复)，观察剂量限制性不良反应，并确定Ⅱ期推荐剂量，应用于Ⅱ期阶段的治疗。主要研究终点为安罗替尼的最大耐受剂量和联合治疗的客观有效率(ORR)。 结果 2018年5月至2020年1月，共纳入31例晚期结直肠癌患者。Ⅰ期阶段未观察到剂量限制性不良反应，未达到最大耐受剂量，Ⅱ期阶段安罗替尼的推荐剂量确定为12 mg/d。全组患者中30例可评估疗效，部分缓解8例，疾病稳定21例，疾病进展1例；ORR为25.8%(8/31)，疾病控制率为93.5%(29/31)。中位随访时间29.5个月，全组患者的中位无进展生存时间为6.9个月(95% ：3.7~9.3个月)，中位总生存时间为17.6个月(95% ：12.4个月~未达到)。全组患者中发生率>10%的3~4级治疗相关不良事件为粒细胞减少(25.8%，8/31)和腹泻(16.1%，5/31)，未发生治疗相关死亡事件。 结论 安罗替尼联合伊立替康在晚期结直肠癌患者的二线治疗中表现出良好的安全性和抗肿瘤活性。

• 曲妥珠单抗辅助治疗对T1N0M0期人表皮生长因子受体2阳性乳腺癌远期生存影响的真实世界研究

  孙同辉,芦梓楠,宋海涛,孙刚

  目的 探讨曲妥珠单抗辅助治疗对人表皮生长因子受体2(HER-2)阳性早期乳腺癌患者预后的影响。方法 研究为回顾性研究，选取2010年1月至2019年12月就诊于新疆医科大学附属肿瘤医院并接受手术的HER-2阳性T1N0M0期乳腺癌患者，根据是否接受曲妥珠单抗治疗将患者分为治疗组和对照组。采用倾向性评分匹配(PSM)平衡两组间患者基线特征差异造成的混杂偏倚，Cox比例风险模型分析影响无病生存的危险因素，Kaplan-Meier法估计PSM前后两组患者的3、5年无病生存率和总生存率。结果 HER-2阳性T1N0M0期乳腺癌患者291例，其中T1a期21例(7.2%)，T1b期61例(21.0%)，T1c期209例(71.8%)。PSM前，治疗组132例，对照组159例，PSM前全组患者的5年无病生存率为88.5%，5年生存率为91.5%。PSM后，治疗组103例，对照组103例，PSM后全组患者的5年无病生存率为86.0%，5年生存率为88.5%。PSM前，治疗组和对照组患者的肿瘤大小、组织学分级、脉管是否侵犯、Ki-67指数、术后是否化疗、术后是否放疗差异均有统计学意义(均 0.05)。多因素分析显示，组织学分级( ＝2.927，95 ：1.476~5.805， ＝0.002)、脉管侵犯( ＝3.410，95 ：1.170~9.940， ＝0.025)、月经状态( ＝3.692，95 ：1.021~13.344， ＝0.046)、是否化疗( ＝0.238，95 ：0.079~0.720， ＝0.011)是无病生存的独立影响因素。PSM后，治疗组患者5年无病生存率为89.2%，对照组为83.5%( ＝0.237)；治疗组患者5年生存率为96.1%，对照组为84.7%( ＝0.036)。 结论 术后曲妥珠单抗靶向治疗可以降低HER-2阳性T1N0M0期乳腺癌患者的复发转移风险。