中华肿瘤杂志

中华肿瘤杂志2023年第06期

• 肺部多发结节的诊断和治疗

  钟华,姚烽,陈群慧,郭金栋,张琳程,张瑶,韩宝惠

  null CT筛查的开展显著降低了肺癌高危人群的死亡率，同时也提高了早期肺癌的诊断率，包括肺部多发结节尤其是多发磨玻璃病灶的检出。多原发肺癌构成了肺癌的一种特殊类型，以早期腺癌居多，生物学行为较为惰性，虽然病程进展通常较缓慢、少有淋巴结转移，但病灶数量多、分布位置散在仍然增加了临床诊疗的难度。多发肺结节患者往往不能通过手术一次性切除所有病灶，而反复进行外科手术治疗则带来一个两难问题，即手术切除病灶给患者带来的临床获益是否大于患者肺功能损失造成的潜在风险。因此，尽管临床工作中常见因焦虑心态而急于进行治疗的多发肺结节患者，治疗指征的把控和治疗方式的选择仍需全面考量。目前针对多发结节介入干预的时机、外科手术治疗的方式和局部治疗的地位仍有较多争议，尚无统一标准。笔者及所在的多学科诊疗团队就临床上积累的肺部多发结节诊疗经验，对肺多发结节的诊断评估、外科手术治疗、非手术局部治疗、靶向和免疫辅助治疗以及临床随访进行了详细评述。

• 三维培养肿瘤模型在结直肠癌中的研究进展

  王晨童,周皎琳,林国乐,尹申意,丛林,张冠南,安杨,邱小原

  null 传统的肿瘤培养模型包括二维肿瘤细胞培养和异种移植物模型，前者存在缺乏肿瘤异质性、模型失真等问题，后者存在建模成功率偏低、耗时长、价格贵等缺点。近年出现的体外三维(3D)培养模型可以较好地模拟体内肿瘤的空间结构与生长环境，保留肿瘤细胞的病理与遗传学特征，并反映肿瘤细胞间、肿瘤与微环境间的复杂相互作用，逐渐成为肿瘤机制研究、药物筛选和肿瘤个体化治疗的有力工具。球状体、类器官、微流控装置等3D肿瘤模型技术日渐成熟，共培养、3D生物打印、气液界面等新技术的应用使模型的仿真性进一步提高，一些模型可重建肿瘤微环境，一些模型甚至具有内源性免疫成分与微脉管系统。近年来，有学者将异种移植物模型与类器官技术相结合，构建了体内/体外配对的生物模型库，发挥出两种技术的优势，并可针对具有特定分子学特征的肿瘤进行个体化精准疗法研发。至今，上述技术已广泛应用于结直肠癌研究领域。作者团队目前研究采用结直肠癌患者来源的3D微肿瘤模型指导术后化疗药物选择，建模成功率高、药物筛选实验结果理想。相信随着相关技术的进步，3D肿瘤模型将在结直肠癌研究、药物研发与转化、疗法筛选及个体化治疗等领域发挥巨大作用。

• 长链非编码RNA DRAIC靶向let－7i－5p调控肺腺癌细胞的增殖凋亡和迁移侵袭

  刘宝林,崔逸爽,田亚萍,朱英泽,洪紫谦,张雪梅,孙国贵

  目的 探讨长链非编码RNA DRAIC对肺腺癌细胞增殖、凋亡和迁移侵袭的影响及其作用机制。方法 采用实时荧光定量聚合酶链反应检测2019—2020年于唐山市人民医院行手术治疗的40例肺腺癌患者的肺癌组织及相应癌旁正常组织中DRAIC的表达。体外培养肺腺癌细胞A549和H1299，分为si－NC组、si－DRAIC组、miR－NC组、let－7i－5p mimics组、si－DRAIC+inhibitor－NC组和si－DRAIC+let－7i－5p inhibitor组，细胞计数试剂盒8实验和克隆形成实验检测细胞增殖能力，流式细胞术检测细胞凋亡情况，Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力，Western blot检测细胞中Caspase－3、Caspase－9、Bcl－2和Bax蛋白的表达。核质分离检测DRAIC和let－7i－5p亚细胞定位。双荧光素酶报告基因实验验证DRAIC与let－7i－5p的调控关系。两组间比较采用独立样本 检验，多组间比较采用单因素方差分析，相关分析采用Pearson相关分析。 结果 肺腺癌组织中DRAIC的表达水平高于癌旁正常组织，let－7i－5p的表达水平低于癌旁正常组织(均 <0.05)。肺腺癌组织中DRAIC和let－7i－5p的表达呈负相关( ＝－0.737， <0.05)。si－DRAIC组A549和H1299细胞的48、72和96 h吸光度值均低于si－NC组(均 <0.05)，si－DRAIC组A549和H1299细胞克隆数分别为(91.00±6.08)个和(50.67±1.53)个，细胞迁移数分别为(606.67±31.34)个和(483.33±45.96)个，细胞侵袭数分别为(185.00±8.19)个和(365.00±33.87)个，均低于si－NC组[分别为(136.67±6.51)个和(76.67±4.51)个，(960.00±33.06)个和(741.67±29.67)个，(447.33±22.05)个和(688.00±32.97)个，均 <0.05]。si－DRAIC组A549和H1299细胞凋亡率分别为(13.43±2.79)%和(23.77±1.04)%，均高于si－NC组[分别为(4.53±0.42)%和(6.60±1.42)%，均 <0.05]，si－DRAIC组细胞中Caspase－3、Caspase－9和Bax蛋白表达水平高于si－NC组，Bcl－2蛋白表达低于si－NC组(均 <0.05)。DRAIC和let－7i－5p主要位于细胞质，DRAIC靶向负调控let－7i－5p。let－7i－5p mimics组A549和H1299细胞48、72和96 h吸光度值均低于miR－NC组(均 <0.05)，let－7i－5p mimics组A549和H1299细胞克隆数分别为(131.33±14.47)个和(59.33±4.93)个，细胞迁移数分别为(137.67±3.06)个和(425.00±11.14)个，细胞侵袭数分别为(54.00±4.36)个和(80.00±4.58)个，均低于miR－NC组[分别为(171.33±6.11)个和(80.33±7.09)个，(579.33±82.03)个和(669.33±21.13)个，(112.67±11.59)个和(333.33±16.80)个，均 <0.05]。let－7i－5p mimics组A549和H1299细胞凋亡率分别为(14.57±1.10)%和(23.97±0.42)%，均高于miR－NC组[分别为(6.97±1.11)%和(7.07±1.21)%，均 <0.05]，let－7i－5p mimics组细胞中Caspase－3、Caspase－9和Bax蛋白表达高于miR－NC组，Bcl－2蛋白表达低于miR－NC组(均 <0.05)。si－DRAIC+let－7i－5p inhibitor组A549和H1299细胞48、72和96h吸光度值均高于si－DRAIC+inhibitor－NC组(均 <0.05)，si－DRAIC+let－7i－5p inhibitor组A549和H1299细胞克隆数分别为(82.00±5.29)个和(77.67±4.93)个，细胞迁移数分别为(774.33±35.81)个和(569.67±18.72)个，细胞侵袭数分别为(670.33±17.21)个和(263.67±3.06)个，均高于si－DRAIC+inhibitor－NC组[分别为(59.00±5.57)个和(41.33±7.57)个，(455.67±19.04)个和(433.67±16.77)个，(451.00±17.52)个和(182.33±11.93)个，均 <0.05]。si－DRAIC+let－7i－5p inhibitor组细胞凋亡率分别为(7.73±0.45)%和(8.00±0.53)%，均低于si－DRAIC+inhibitor－NC组[分别为(19.13±1.50)%和(28.40±0.53)%，均 <0.05]，si－DRAIC+let－7i－5p inhibitor组细胞中Caspase－3、Caspase－9和Bax蛋白表达低于si－DRAIC+inhibitor－NC组，Bcl－2蛋白表达高于si－DRAIC+inhibitor－NC组(均 <0.05)。 结论 DRAIC在肺腺癌中高表达，DRAIC通过靶向let－7i－5p促进肺腺癌细胞的增殖和迁移侵袭能力，抑制细胞凋亡。

• 敲低乙酰辅酶A羧化酶1通过上调热休克蛋白27促进食管鳞状细胞癌迁移

  钱河,谷城威,刘玉珍,赵宝生

  目的 探讨敲低乙酰辅酶A羧化酶1(ACC1)对食管鳞状细胞癌(以下简称食管鳞癌)KYSE－450细胞迁移的影响及分子机制。方法 慢病毒转染法建立对照组细胞系sh－NC和敲低ACC1的细胞系sh－ACC1，脂质体法转染人热休克蛋白27(HSP27) siRNA建立对照及敲低HSP27的细胞系si－NC和si－HSP27，选择性乙酰基转移酶p300/CBP抑制剂C646抑制组蛋白乙酰化并设置对照组DMSO。Transwell法检测细胞迁移能力，实时荧光定量聚合酶链反应检测HSP27 mRNA的表达，Western blot检测ACC1、H3K9ac、HSP27和上皮－间充质转化相关蛋白E－cadherin和Vimentin的表达。结果 sh－NC组细胞中ACC1的表达水平高于sh－ACC1组(<0.01)。sh－NC组细胞迁移数[(159.00±24.38)个]低于sh－ACC1组[(361.80±26.81)个，<0.01]，sh－NC组细胞中E－cadherin蛋白表达水平高于sh－ACC1组，Vimentin蛋白表达水平低于sh－ACC1组(均<0.05)。sh－NC+si－NC组细胞迁移数[(189.20±16.02)个]低于sh－ACC1+si－NC组[(371.60±38.40)个，<0.01]，sh－NC+si－NC组细胞迁移数高于sh－NC+si－HSP27组[(83.80±24.38)个，<0.01]，sh－ACC1+si－NC组迁移细胞数高于sh－ACC1+si－HSP27组[(152.40±24.30)个，<0.01]。sh－NC+si－NC组细胞中E－cadherin蛋白表达水平低于sh－NC+si－HSP27组，高于sh－ACC1+si－NC组，Vimentin蛋白表达水平高于sh－NC+si－HSP27组，低于sh－ACC1+si－NC组(均<0.05)；sh－ACC1+si－NC组细胞中E－cadherin、Vimentin蛋白表达水平与sh－ACC1+si－HSP27组比较，差异有统计学意义均(均<0.01)。C646 20 μmmo/L处理细胞24 h后，sh－NC+DMSO组细胞迁移数[(190.80±11.95)个]低于sh－ACC1+DMSO组[(395.00±17.10)个，<0.01]，sh－NC+DMSO组细胞迁移数低于sh－NC+C646组[(256.20±23.32)个，<0.01]，sh－ACC1+DMSO组细胞迁移数高于sh－ACC1+C646组[(87.80±11.23)个，<0.01]。sh－NC+DMSO组细胞中H3K9ac、HSP27、E－cadherin、Vimentin蛋白表达水平与sh－ACC1+DMSO组和sh－NC+C646组比较，差异均有统计学意义(均<0.01)，sh－ACC1+DMSO组细胞中H3K9ac、HSP27、E－cadherin、Vimentin蛋白表达水平与sh－ACC1+C646组比较，差异有统计学意义均(均<0.01)。结论 敲低ACC1通过增加组蛋白乙酰化上调HSP27促进食管鳞癌KYSE－450细胞迁移。

• 仑伐替尼通过下调IGF1R/Mek/Erk信号通路治疗瑞戈非尼耐药的肝细胞癌

  张菁,匡淑雯,黄宁,张嘉峻,刘梅,王黎明

  目的 探讨仑伐替尼对瑞戈非尼耐药肝癌细胞的治疗疗效及其作用机制。方法 采用细胞计数试剂盒8(CCK－8)和克隆形成实验观察仑伐替尼对肝癌细胞生长的抑制作用，流式细胞术检测仑伐替尼处理后瑞戈非尼耐药肝细胞癌细胞的凋亡情况，Western blot和免疫组化染色检测相关蛋白表达水平变化，小鼠皮下成瘤实验观察仑伐替尼对瑞戈非尼耐药肝癌细胞体内成瘤能力的抑制效果。结果 CCK－8和克隆形成实验显示，仑伐替尼能够抑制肝癌瑞戈非尼耐药细胞的增殖能力；仑伐替尼组HepG2、SMMC7721和瑞戈非尼耐药的HepG2、SMMC7721细胞克隆数[分别为(120.67±11.06)个、(53.00±11.14)个、(55.00±9.54)个和(78.67±14.64)个]均低于对照组[分别为(478.00±24.52)个、(566.00±27.87)个、(333.67±7.02)个和(210.00±12.77)个，均 <0.05]。流式细胞术检测显示，仑伐替尼能够促进肝癌瑞戈非尼耐药细胞凋亡，仑伐替尼组HepG2、SMMC7721和瑞戈非尼耐药的HepG2、SMMC7721细胞凋亡率[分别为(12.30±0.70)%、(9.83±0.38)%、(15.90±1.32)%和(10.60±0.00)%]均高于对照组[分别为(7.50±0.87)%、(5.00±1.21)%、(8.10±1.61)%和(7.05±0.78)%，均 <0.05]。仑伐替尼处理后凋亡相关蛋白比值提示细胞凋亡能力增加。动物实验显示仑伐替尼治疗能够在体内抑制肝癌瑞戈非尼耐药细胞的生长。免疫组化及Western blot结果显示，仑伐替尼能够下调瑞戈非尼耐药细胞中异常活化的IGF1R/Mek/Erk信号通路。 结论 仑伐替尼能够逆转肝细胞癌瑞戈非尼耐药，其机制可能是通过下调IGF1R/Mek/Erk信号通路实现。

• miRNA－125b经p53通路调控Alisertib耐药细胞代谢的机制研究

  杨富丽,陈欣,郑斐,刘相叶,孙娜,李容庆,蒋振,韩静,杨晶

  目的 探讨Alisertib耐药的分子机制并寻找Alisertib耐药的潜在靶点。方法 用Alisertib连续处理结肠癌细胞系建立耐药细胞株并命名为HCT－8－7T细胞，将HCT－8－7T细胞及人结肠癌细胞系HCT－8接种至免疫缺陷小鼠体内，观察小鼠其他器官转移瘤的情况。采用细胞克隆实验及Transwell迁移实验检测细胞的增殖及迁移能力，采用Seahorse分析仪检测细胞糖酵解及谷氨酰胺代谢能力的差异，Western blot和实时荧光定量聚合酶链反应检测糖酵解及上皮－间质转化(EMT)标志物相关蛋白表达水平及mRNA水平。结果 接种HCT－8－7T细胞的小鼠肝脏、肺脏、肾、卵巢等转移灶数量多于接种HCT－8细胞的小鼠(均<0.05)。HCT－8－7T细胞腺嘌呤核苷三磷酸水平[(0.10±0.01)mmol/L]、糖酵解水平[(81.77±8.21)mpH/min]及糖酵解能力[(55.50±3.48)mpH/min]均高于HCT－8细胞[分别为(0.04±0.01)mmol/L、(27.77±2.55)mpH/min和(14.00±1.19)mpH/min，均<0.05]。HCT－8－7T细胞中p53蛋白表达水平及mRNA表达水平低于HCT－8细胞(均<0.05)。HCT－8－7T细胞中miR－125b表达水平(2.21±0.12)高于HCT－8细胞(1.00±0.00，<0.001)。在HCT－8－7T细胞中，过表达p53导致细胞克隆数[(162.00±24.00)个]及细胞迁移率[(18.53±5.67)%]低于空白对照组[分别为(274.70±40.50)个和(100.00±29.06)%，均<0.05]。miR－125b mimic组HCT－8－7T细胞糖酵解水平[(25.28±9.51)mpH/min]低于空白对照组[(54.38±12.70)mpH/min，<0.05]。与空白对照组HCT－8－7T细胞比较，miR－125b mimic组HCT－8－7T细胞中p53和β－catenin蛋白水平升高，PFK1和HK1蛋白水平降低(均<0.05)。结论 miR－125b沉默p53是导致Alisertib耐药的机制之一，靶向miR－125b是克服Alisertib耐药的潜在可用之策。

• 胸段食管鳞状细胞癌右喉返神经旁淋巴结转移特点

  袁立功,毛友生

  目的 分析胸段食管鳞状细胞癌(鳞癌)右喉返神经旁淋巴结转移特点及其影响因素，探讨合理的淋巴结清扫范围及右喉返神经旁淋巴结清扫的价值。方法 回顾性分析2015—2018年于中国医学科学院肿瘤医院行右胸入路食管癌根治术+胸腹二野淋巴结清扫或颈胸腹三野淋巴结清扫术的胸段食管鳞癌患者的临床病理资料，影响因素分析采用logistic回归分析。结果 516例患者中，发生右喉返神经旁淋巴结转移80例，转移率为15.5%。全组患者共清扫右侧喉返神经旁淋巴结1 127枚，115枚淋巴结存在转移，淋巴结转移度为10.2%。T分期、肿瘤分化程度和肿瘤位置与右喉返神经旁淋巴结转移有关(均<0.05)。胸上段食管鳞癌右喉返神经旁淋巴结转移率(23.4%，26/111)高于胸中段、胸下段鳞癌[分别为13.5%(40/296)和12.8%(14/109)]，低分化食管鳞癌患者右喉返神经旁淋巴结转移率[20.6%(37/180)]高于中、高分化食管鳞癌患者[分别为14.6%(39/267)和5.8%(4/69)]。T4期食管鳞癌患者右喉返神经旁淋巴结转移率[(27.3%(3/11)]高于T1、T2、T3期食管鳞癌患者[分别为9.6%(19/198)、19.0%(16/84)和18.8%(42/223)]。多因素回归分析显示，肿瘤位置(＝0.61，95% ：0.41~0.90，＝0.013)、肿瘤浸润深度(＝1.46，95% ：1.11~1.92，＝0.007)、肿瘤分化程度(＝1.67，95% ：1.13~2.49，＝0.011)为食管鳞癌右侧喉返神经旁淋巴结转移的独立危险因素。结论 右侧喉返神经旁淋巴结转移率较高，应作为食管鳞癌手术常规清扫部位。肿瘤位置、肿瘤浸润深度、肿瘤分化程度是食管鳞癌右侧喉返神经旁淋巴结转移的危险因素。

• 融合筋膜联合植入物即刻乳房重建的可行性研究

  陈祖锦,陈翱翔,张斌,王欣,曹旭晨

  目的 探讨融合筋膜法进行植入物即刻乳房重建的肿瘤学及外科学安全性。方法 回顾性分析2014—2017年天津医科大学肿瘤医院343例植入物乳房即刻重建患者的临床资料，比较融合筋膜与其他方法乳房重建患者的5年无局部区域复发生存率、5年无病生存率和5年总生存率，分析不同植入物患者组间发生植入物取出的并发症发生率。结果 343例乳房重建患者中，融合筋膜组(筋膜组)95例，非筋膜组248例(牛心包补片组25例，肌瓣组223例)。中位随访49个月，筋膜组与非筋膜组患者的5年无局部区域复发生存率(分别为90.1%和94.9%)、5年无病生存率(分别为89.2%和87.6%)和5年总生存率(分别为95.2%和95.1%)差异均无统计学意义(均 >0.05)。补片组植入物取出的并发症发生率为24.0%(6/25)，筋膜组与肌瓣组分别为2.1%(2/95)和2.2%(5/223)。 结论 融合筋膜联合植入物即刻乳房重建是安全可行的，较肌肉瓣损伤小，与补片比较更经济且并发症少。

• 曲沙他滨的临床耐受性和药代动力学研究

  宋岩,崔成旭,张雯,孙永琨,杨林,周骅,刘海凤,周爱萍

  目的 探讨曲沙他滨在中国晚期或复发、对标准治疗耐药的恶性肿瘤患者中的安全性和疗效。方法 研究为Ⅰ期前瞻性研究，选取中国医学科学院肿瘤医院的恶性肿瘤患者，患者接受曲沙他滨剂量递增治疗，共设5个药物剂量组(分别为1.8、3.6、4.8、6.4和8.0 mg/m 组)，每周给药1次连用2周，休息1周，每3周为1个治疗周期。收集患者的安全性信息，采用美国国家癌症研究所常见药物毒性反应分级标准4.0版进行评估。 结果 2018年4月至2019年5月，19例恶性肿瘤患者接受曲沙他滨单药静脉输注，常见的不良反应为乏力(89.5%，17/19)、白细胞减少(84.2%，16/19)和中性粒细胞减少(78.9%，15/19)。剂量限制性不良反应为中性粒细胞减少，最大耐受剂量为6.4 mg/m 。全组患者的最佳疗效为疾病稳定(43.8%)。各剂量组的消除相半衰期为15.91~76.63 h。 结论 曲沙他滨的不良反应可耐受，推荐的Ⅱ期研究剂量为6.4 mg/m 。

• 上尿路原发性小细胞神经内分泌癌3例并文献复习

  沈翀,应向荣,吴刚峰,夏丹

  null 上尿路(肾盂、输尿管)原发性小细胞神经内分泌癌是一种极为罕见的恶性肿瘤。小细胞神经内分泌癌最常见的原发部位是肺，近年来，肺外病例报道增多，如食管、宫颈和泌尿生殖系统。泌尿生殖系统小细胞神经内分泌癌好发于膀胱和前列腺，肾盂、输尿管原发性肿瘤罕见。小细胞神经内分泌癌是一种具有高度侵袭性的恶性肿瘤，容易远处转移，预后极差。由于罕见，对上尿路原发性小细胞神经内分泌癌的起源、疾病进展、治疗等方面知之甚少。本文介绍绍兴市人民医院和浙江大学附属第一医院泌尿外科自2009—2021年治疗的3例患者，回顾文献报道，介绍上尿路原发性小细胞神经内分泌癌可能的起源、临床表现、病理结果、治疗及预后，以期指导临床实践。

• 肺癌手术学演进简史

  赵晨光,牟巨伟,赫捷

  null 在肺癌的综合治疗中，外科手术治疗是重要的组成部分。在肺癌手术学的发展历史上，国内外的学者经历了对肺局部解剖学的不断认识、对手术设备的不断创新、对手术方式的不断改革等之后，才逐渐奠定了目前肺癌手术学的地位和整体治疗框架。在肺癌手术诊治流程不断发展和完善的过程中，形成了一整套肺癌筛查、早诊早治、标准化手术流程、围术期快速康复、术后辅助治疗及随访的标准化诊治流程。肺癌手术学今天的成就是在开拓创新的过程中取得的，临床工作者应该回顾总结既往发展历史，从中汲取经验继续创造肺癌外科新的辉煌。文章对肺癌手术学的演进简史进行了总结概括，以提高临床医师对肺癌手术史的认识和了解。