中华肿瘤杂志

作者：宋伟杰,张璠,王兆松,田建飞,牛瑞芳

单位：国家恶心肿瘤临床医学研究中心　天津市肿瘤防治重点实验室　天津医科大学肿瘤医院实验动物中心，天津300060,国家恶心肿瘤临床医学研究中心　天津市肿瘤防治重点实验室　天津医科大学肿瘤医院实验动物中心，天津300060,国家恶心肿瘤临床医学研究中心　天津市肿瘤防治重点实验室　天津医科大学肿瘤医院实验动物中心，天津300060,国家恶心肿瘤临床医学研究中心　天津市肿瘤防治重点实验室　天津医科大学肿瘤医院实验动物中心，天津300060

关键词：肺肿瘤;CRISPR/Cas9;基因敲除模型;转移模型;膜联蛋白A2

基金：国家自然科学基金E81372844

目的 建立膜联蛋白A2（ANXA2）基因敲除小鼠模型，为后续ANXA2相关机制研究提供有效工具。方法 采用CRISPR/Cas9技术构建基因敲除小鼠模型，获得的模型经过组织DNA提取后进行PCR测序和Western blot检测，鉴定ANXA2基因型和蛋白的表达。成功构建的模型分为ANXA2敲除组与野生型组（WT组），通过小鼠尾静脉注射小鼠肺癌细胞（LLC）制作转移模型，使用活体成像技术对转移灶形成进行监测，并最终统计两组小鼠的生存率。结果 设计针对ANXA2第1外显子的小向导RNA序列，利用显微注射技术获得16只首建鼠小鼠。通过同种小鼠杂交技术，最终获得30只纯合后代。品系建成后，小鼠分为ANXA2敲除组与WT组，每组各8只小鼠，分别建立LLC肺转移模型。WT组与ANXA2敲除组相比，转移灶数量显著增多（分别为7和1个），荧光强度强于敲除组（ =0.002）。GEPIA2数据库搜索肺癌患者肿瘤组织与正常组织中ANXA2基因的表达，肺癌肿瘤组织中ANXA2基因的表达水平高于正常组织（ ＜0.05）。ANXA2高表达与患者的无病生存时间、总生存时间缩短有关（均 ＜0.05）。ANXA2敲除组小鼠中位生存时间（43 d）相比于WT组小鼠（26 d）长（ =0.017），ANXA2表达与肺癌患者预后有关。 结论 ANXA2与恶性肿瘤转移密切相关，有望成为恶性肿瘤转移治疗新靶点。

来源：2025年第03期

《中华肿瘤》期刊编辑部

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