中华肿瘤杂志

作者：龚亮,田璐,李艳春,吴志猛,黄朝晖

单位：江南大学附属医院肿瘤研究所，无锡214062,江南大学附属医院肿瘤研究所，无锡214062,江南大学附属医院肿瘤研究所，无锡2140622江南大学生物工程学院糖化学与生物技术教育部重点实验室，无锡214122

关键词：结直肠肿瘤;外泌体;表皮生长因子受体;miR-204-5p;纳米抗体;糖代谢工程;分子靶向治疗

基金：江苏省重点研发计划-社会发展计划面上项目EBE2019632

目的 制备表皮生长因子（EGFR）特异性纳米抗体工程化的外泌体（Exo）载药体系并评估其靶向治疗结直肠癌的效果。方法 利用稳定表达泛癌抑制因子miR-204-5p的细胞系HEK293T，生产富含miR-204-5p的人源外泌体（hExo）。再利用糖代谢工程结合生物正交反应策略，对这些Exo进行抗EGFR纳米抗体7D12修饰，获得载有miR-204-5p的工程化Exo 7D12-hExo（204），采用Western blot、电镜、动态光散射等技术对其进行表征，采用免疫荧光和实时荧光定量聚合酶链反应评估7D12-hExo（204）的结直肠癌靶向性，采用细胞生长曲线、平板克隆、Transwell实验、凋亡分析评估了7D12-hExo（204）的体外抗肿瘤活性，通过结直肠癌裸鼠异种移植瘤模型评估7D12-hExo（204）的体内抗肿瘤活性及安全性。结果 7D12-hExo的粒径为（116.8±36.8）nm，电位在-10 mV左右，与未修饰的hExo相比，均无明显变化。免疫荧光法检测结果显示，对于EGFR 的HCT116细胞，hExo组、7D12-hExo组和7D12+7D12-hExo组的荧光强度分别为48.4±3.9、141.0±6.6和38.7±3.2，与hExo组相比，7D12-hExo组HCT116细胞中荧光强度增强（ ＜0.05）；与7D12-hExo组相比，7D12+7D12-hExo组HCT116细胞中荧光强度降低（ ＜0.05）。而EGFR 的SW620结直肠癌细胞对hExo和7D12-hExo的摄取无明显差异。hExo（204）组HCT116细胞克隆数为（215.0±14.0）个，细胞侵袭数为（862.3±61.4）个，细胞迁移数为（1 197.0±36.7）个，凋亡率为（14.1±1.4）%，7D12-hExo（204）组分别为（65.0±15.1）个、（232.0±27.9）个、（725.7±32.7）个和（29.3±1.0）%，7D12-hExo（204）抑制了HCT116细胞的增殖、侵袭和迁移能力（均 ＜0.05），而促进了HCT116细胞凋亡（ ＜0.05）。裸鼠实验显示，7D12-hExo（204）能显著抑制HCT116细胞移植瘤的生长，抑瘤率达82.8%，但小鼠体重未发生明显变化，心、肝、脾、肺、肾等主要器官的组织HE染色也未显示异常。 结论 成功制备了纳米抗体7D12修饰的天然载有miR-204-5p的Exo，可高效递送miR-204-5p进入EGFR 结直肠癌细胞，发挥良好的抗肿瘤效应，同时显示出良好的安全性。

来源：2025年第05期

《中华肿瘤》期刊编辑部

查看中华肿瘤杂志2025年第05期