中华肿瘤杂志

作者：郑静,何静

单位：四川省肿瘤医院　四川省肿瘤研究所　四川省癌症防治中心　四川省肿瘤临床医学研究中心　电子科技大学附属肿瘤医院妇瘤科，成都　610041,四川省肿瘤医院　四川省肿瘤研究所　四川省癌症防治中心　四川省肿瘤临床医学研究中心　电子科技大学附属肿瘤医院妇瘤科，成都　610041四川省肿瘤医院　四川省肿瘤研究所　四川省癌症防治中心　四川省肿瘤临床医学研究中心　电子科技大学附属肿瘤医院妇瘤科，成都　610041

关键词：卵巢肿瘤;miR-3591-3p;P53;顺铂耐药

目的 探讨miR-3591-3p靶向P53对卵巢癌顺铂（DDP）耐药细胞系（SKOV3/DDP）DDP耐药的影响。方法 靶标预测和双荧光素酶实验验证miR-3591-3p靶向调控P53。SKOV3/DDP细胞分为对照组、DDP组、敲低miR-3591-3p表达组（anti-miR-3591-3p）、敲低miR-3591-3p表达对照组（anti-miR-NC）、DDP+敲低miR-3591-3p表达组（DDP+anti-miR-3591-3p）、DDP+敲低miR-3591-3p表达对照组（DDP+anti-miR-NC）、DDP+敲低miR-3591-3p表达+敲低P53表达组（DDP+anti-miR-3591-3p+sh-P53）、DDP+敲低miR-3591-3p表达+敲低P53表达对照组（DDP+anti-miR-3591-3p+sh-NC）。细胞计数试剂盒8实验检测细胞存活率和半抑制浓度（IC ）值，流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡，实时荧光定量聚合酶链反应检测细胞中miR-3591-3p、P53 mRNA表达水平，Western blot检测细胞中P53、P-gp、多药耐药相关蛋白1（MRP1）、Ki-67、CyclinD1、Bcl-2、Bax蛋白表达水平。裸鼠分为对照组、DDP组、敲低miR-3591-3p表达组（anti-miR-3591-3p）、敲低miR-3591-3p表达对照组（anti-miR-NC）、DDP+敲低miR-3591-3p表达组（DDP+anti-miR-3591-3p）。采用皮下注射SKOV3/DDP细胞制备移植瘤模型，检测肿瘤体积、质量、肿瘤组织miR-3591-3p、P53 mRNA和蛋白表达水平。 结果 miR-3591-3p和P53存在结合位点，过表达miR-3591-3p后，野生型P53荧光素酶活性降低（ ＜0.05），而突变型P53的荧光素酶活性未见明显差异（ ＞0.05）。DDP处理或敲低miR-3591-3p表达后，miR-3591-3p水平降低，P53 mRNA和蛋白水平升高（均 ＜0.05），细胞存活率、IC 值［DDP组24、36、48 h IC 值分别为（21.26±2.95）mg/L、（17.38±1.93）mg/L和（13.76±1.46）mg/L 对照组分别为（41.06±4.39）mg/L、（36.15±3.46）mg/L和（29.87±1.39）mg/L；anti-miR-3591-3p组24、36、48 h IC 值分别为（19.96±2.19）mg/L、（17.62±3.52）mg/L和（13.05±1.53）mg/L，anti-miR-NC组分别为（43.37±3.83）mg/L、（40.47±2.82）mg/L和（31.41±0.73）mg/L］降低，S期细胞比例降低，G /G 期细胞比例、细胞凋亡率［DDP组为（27.00±2.00）%，对照组为（3.33±1.53）%；anti-miR-3591-3p组为（28.98±3.14）%，anti-miR-NC组为（4.05±1.96）%］升高，P-gp、MRP1、Ki-67、CyclinD1、Bcl-2蛋白水平降低，Bax蛋白水平升高（均 ＜0.05）；敲低miR-3591-3p表达能够增强DDP对上述指标的影响（均 ＜0.05）；敲低P53表达能够抑制敲低miR-3591-3p表达对上述指标的影响（均 ＜0.05）。DDP处理或敲低miR-3591-3p表达后，裸鼠肿瘤体积［DDP组14、21、28 d肿瘤体积分别为（284.26±24.51）mm 、（563.21±44.17）mm 和（741.32±72.01）mm ，对照组分别为（384.25±41.25）mm 、（840.32±71.27）mm 和（1 242.47±100.54）mm ；anti-miR-3591-3p组14、21、28 d肿瘤体积分别为（274.47±27.77）mm 、（584.68±61.14）mm 和（815.24±73.19）mm ，anti-miR-NC组分别为（355.47±46.84）mm 、（804.24±79.54）mm 和（1 350.47±108.37）mm ］、肿瘤质量［DDP组（0.85±0.15）g，对照组（1.34±0.12）g；anti-miR-3591-3p组（0.88±0.14）g，anti-miR-NC组（1.34±0.10）g］减小，肿瘤组织中miR-3591-3p水平降低，P53 mRNA和蛋白升高（均 ＜0.05）；敲低miR-3591-3p表达能够增强DDP对上述指标的影响（均 ＜0.05）。 结论 miR-3591-3p靶向P53增强SKOV3/DDP细胞DDP耐药。

来源：2025年第06期

《中华肿瘤》期刊编辑部

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