中华肿瘤杂志

作者：崔逸爽,赵阅,田亚萍,郑璇,仵红娇,张雪梅,孙国贵

单位：华北理工大学附属医院检验科，唐山063000,华北理工大学附属医院检验科，唐山063000

关键词：肺肿瘤;血清反应因子;长链非编码RNA FGD5-AS1;转录因子

基金：国家自然科学基金面上项目E82172658

目的 探讨血清反应因子（SRF）与长链非编码RNA（lncRNA）FGD5-AS1在肺腺癌中的作用及机制。方法 收集2020—2022年于唐山市人民医院治疗的肺腺癌患者的血浆和癌组织蜡块以及健康人血浆，通过实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）实验检测SRF在肺腺癌组织及细胞中的表达情况，以及lncRNA FGD5-AS1在肺腺癌组织、血浆及细胞中的表达情况，分别采用免疫组织化学及原位杂交实验检测肺腺癌组织芯片（2021年购自上海芯超生物科技有限公司）中SRF和lncRNA FGD5-AS1的表达水平。体外培养肺腺癌细胞A549、H1299和H1975，分为si-NC和si-SRF组、si-NC和si-lncRNA FGD5-AS1组、pcDNA3.1和lncRNA FGD5-AS1组、si-NC+pcDNA3.1/si-SRF+pcDNA3.1/si-SRF+lncRNA FGD5-AS1组，采用细胞计数试剂盒8（CCK-8）、克隆形成、EdU、Transwell和划痕实验分别检测以上组别肺腺癌细胞的增殖、侵袭和迁移能力。通过JASPAR数据库预测SRF与lncRNA FGD5-AS1启动子的结合位点，双荧光素酶实验、染色质免疫沉淀（ChIP）及电泳迁移率（EMSA）实验验证SRF和lncRNA FGD5-AS1之间的调控作用。裸鼠皮下成瘤实验检测稳定敲降SRF及稳定过表达lncRNA FGD5-AS1的细胞对移植瘤生长的影响。结果 免疫组化结果表明，肺腺癌患者癌组织中SRF的平均光密度值（1.49±0.33）高于癌旁组织（1.00±0.00， ＜0.001）。肺腺癌患者癌蜡块组织中SRF的表达水平高于癌旁正常组织（ =0.037）。CCK-8、克隆形成、划痕和Transwell实验结果显示，敲低SRF会抑制A549和H1299细胞的增殖、迁移和侵袭能力［si-NC组A549细胞克隆数、迁移数、侵袭数、48 h迁移距离比分别为（233.70±18.50）个、（808.70±6.11）个、（489.70±53.00）个和1.00±0.03，si-SRF组A549细胞克隆数、迁移数、侵袭数、48 h迁移距离比分别为（131.30±22.50）个、（403.00±9.54）个、（372.70±26.27）个和2.14±0.09；si-NC组H1299细胞克隆数、迁移数、侵袭数、48 h迁移距离比分别为（194.30±20.98）个、（988.70±64.52）个、（907.70±67.02）个和1.00±0.05，si-SRF组H1299细胞克隆数、迁移数、侵袭数、48 h迁移距离比分别为（137.70±7.77）个、（665.70±157.10）个、（565.70±67.01）个和1.52±0.03；均 ＜0.05］。JASPAR数据库预测显示，SRF与lncRNA FGD5-AS1存在结合位点。双荧光素酶实验、ChIP及EMSA实验证明，SRF可调控lncRNA FGD5-AS1。原位杂交实验表明，肺腺癌患者组织芯片中lncRNA FGD5-AS1的平均光密度值（1.28±0.31）高于癌旁组织（1.00±0.00， ＜0.001）。qRT-PCR实验结果表明，肺腺癌患者蜡块组织中lncRNA FGD5-AS1的表达水平高于癌旁正常组织（ =0.017）。肺腺癌患者血浆中lncRNA FGD5-AS1的表达水平（3.48±2.62）高于健康人血浆（1.02±0.03， ＜0.001）。CCK-8、克隆实验、EDU、划痕和Transwell实验结果示，过表达lncRNA FGD5-AS1会促进细胞的增殖、迁移和侵袭能力［pcDNA3.1组A549细胞克隆数、EdU实验阳性细胞数、侵袭数、48 h迁移距离比分别为（22.67±5.86）个、（1.00±0.09）个、（135.70±13.20）个和0.35±0.02，过表达lncRNA FGD5-AS1组A549细胞克隆数、EdU实验阳性细胞数、侵袭数、48 h迁移距离比分别为（46.33±9.07）个、（1.65±0.10）个、（205.00±13.23）个和0.20±0.01；均 ＜0.05］，敲降lncRNA FGD5-AS1则相反［NC组H1975细胞克隆数、EdU实验阳性细胞数、侵袭数、48 h迁移距离比分别为（75.33±4.16）个、（1.00±0.02）个、（258.70±45.79）个和0.18±0.01，si-lncRNA FGD5-AS1组H1975细胞克隆数、EdU实验阳性细胞数、侵袭数、48 h迁移距离比分别为（37.00±4.00）个、（0.52±0.07）个、（130.70±9.07）个和0.53±0.04；均 ＜0.05］。挽救实验表明，过表达lncRNA FGD5-AS1可以挽救敲降SRF对A549和 H1299细胞增殖和迁移侵袭能力的作用。裸鼠皮下成瘤实验结果提示，稳定敲降SRF的肺腺癌细胞成瘤能力减弱，稳定过表达lncRNA FGD5-AS1的肺腺癌细胞成瘤能力增强。 结论 SRF可通过调控lncRNA FGD5-AS1促进肺腺癌的进展。

来源：2025年第09期

《中华肿瘤》期刊编辑部

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