中华肿瘤杂志

作者：钱锦程,盛琦英,赖映梅,单颖,卓洵辉,丁豪杰

单位：杭州医学院基础医学与法医学院，杭州　310053,杭州医学院基础医学与法医学院，杭州　310053,杭州医学院基础医学与法医学院，杭州　310053,杭州医学院基础医学与法医学院，杭州　310053,杭州医学院基础医学与法医学院，杭州　3100532浙江大学动物科学学院动物医学系，杭州　310058

关键词：恶性黑色素瘤;S100B蛋白;纳米抗体;原核表达

基金：国家级大学生创新训练计划项目E202313023017

目的 以S100钙结合蛋白B（S100B）为靶点，筛选驼源天然纳米抗体文库，获得高亲和力、特异性纳米抗体，为恶性黑色素瘤的早期诊断和治疗提供分子基础。方法 通过亲和淘选，从驼源天然纳米抗体文库中筛选出互补决定区3（CDR3）序列特异的抗S100B纳米抗体，进行原核表达及Ni-NTA亲和层析纯化，并通过酶联免疫吸附试验（ELISA）、Western blot和生物膜层光学干涉技术（BLI）分析纳米抗体的亲和力、特异性和诊断价值。结果 构建获得了1.91×10 CFU的驼源天然抗S100B纳米抗体文库，亲和淘选获得30株特异性纳米抗体，挑选出CDR3序列不同的Nb107、Nb122、Nb212、Nb324进行表达。经过Ni-NTA亲和层析纯化，4株抗S100B纳米抗体纯度较高；Western blot检测结果显示，均能识别S100B重组抗原。ELISA和BLI分析结果显示，Nb212具有较高的亲和力（1.96×10 mol），且其中Nb107、Nb122、Nb212显示出较好的广谱识别能力，能够识别小鼠肝癌细胞（Hepa1-6）、小鼠胶质瘤细胞（GL261）、小鼠乳腺癌细胞（4T1）、小鼠结肠癌细胞（CT26）多种肿瘤细胞和鼠源/人源黑色素瘤，且能较好地与黑色素瘤（A375、B16F10）小鼠模型血清中的鼠源/人源的天然抗原结合。 结论 成功筛选并表达了特异性抗S100B纳米抗体，不仅能够识别天然构象抗原，而且具有广谱性和较强的亲和力，在早期诊断检测方法和广谱靶向多种肿瘤细胞的疫苗或药物的开发方面具有重要应用价值。

来源：2025年第09期

《中华肿瘤》期刊编辑部

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