中华肿瘤杂志

作者：赵媛,张理真,程广东,孙亚伟,马金本,林彦良

单位：山东第一医科大学附属山东省立医院中心实验室，济南250021,山东第一医科大学附属山东省立医院中心实验室，济南250021,山东第一医科大学附属山东省立医院中心实验室，济南250021

关键词：肺腺癌;胆固醇;髓系相关分化标志物;单羧酸转运蛋白1;增殖;转移

基金：国家自然科学基金E81972177

目的 探索髓系相关分化标志物（MYADM）在胆固醇诱导肺腺癌转移中的作用及机制。方法 （1）细胞实验：利用肺腺癌A549和H1975细胞，以0.8 mg/ml胆固醇处理细胞，MYADM敲低组用携带MYADM小干扰RNA的慢病毒转染细胞，MYADM过表达组用MYADM过表达质粒转染细胞。采用Western blot法检测细胞中MYADM、上皮细胞钙黏蛋白（E-cadherin）、β-连环蛋白（β-catenin）、基质金属蛋白酶2（MMP-2）、基质金属蛋白酶9（MMP-9）、波形蛋白（vimentin）的表达，平板克隆形成实验检测细胞的增殖能力，Transwell实验检测细胞的迁移和侵袭能力。采用Western blot法和细胞免疫荧光实验检测胆固醇处理的肺腺癌细胞中Akt磷酸化对MYADM、Rac家族小鸟苷三磷酸酶1（Rac1）的表达和骨髓细胞瘤癌基因（c-Myc）磷酸化的影响，采用Western blot法检测c-Myc敲低对肺腺癌细胞中MYADM和单羧酸转运蛋白1（MCT1）表达的影响，采用染色质免疫沉淀（ChIP）实验检测胆固醇对肺腺癌细胞中c-Myc与MYADM和MCT1启动子之间结合的影响。（2）动物实验：将A549细胞或携带抗MYADM慢病毒的A549细胞分别经尾静脉接种于BALB/c裸鼠，再进一步分为正常饲料组和高胆固醇饲料组。使用活体成像仪检测裸鼠体内肿瘤的生长及转移情况。42 d后，取肺组织，免疫组织化学染色检测相关蛋白的变化。结果 经胆固醇处理后，A549细胞中MYADM的表达水平由1.00±0.18增加到3.28±0.28（ <0.001），H1975细胞中MYADM的表达水平由1.00±0.06增加到2.03±0.10（ <0.001）。与对照组比较，MYADM敲低组肺腺癌细胞中E-cadherin表达升高（ <0.01），β-catenin、MMP-2、MMP-9和vimentin表达降低（均 <0.01）；A549细胞形成的克隆数由（203±23）个下降到（60±18）个（ =0.001），H1975细胞形成的克隆数由（298±64）个下降到（137±51）个（ =0.271）；A549细胞的侵袭细胞数由（212±18）个下降到（99±34）个（ =0.007），H1975细胞的侵袭细胞数由（268±34）个下降到（134±14）个（ =0.003）；549细胞的迁移细胞数由（353±37）个下降到（124±29）个（ =0.001），H1975细胞数的迁移细胞数由（279±41）个下降到（79±19）个（ =0.002）。MYADM过表达组肺腺癌细胞中E-cadherin的表达水平降低（ <0.01），β-catenin、MMP-2、MMP-9和vimentin的表达水平均升高（均 <0.01）；A549细胞形成的克隆数由（94±26）个增加到（298±34）个（ =0.001），H1975细胞形成的克隆数由（83±13）个增加到（331±24）个（ <0.001）；A549细胞的侵袭细胞数由（118±17）个增加到（193±24）个（ =0.012），H1975细胞的侵袭细胞数由（156±19）个增加到（321±12）个（ <0.001）；A549细胞的迁移细胞数由（171±22）个增加到（284±15）个（ =0.002），H1975细胞的迁移细胞数由（178±7）个增加到（263±12）个（ <0.001）。分子机制相关实验结果显示，MYADM过表达促进肺腺癌细胞中MCT1的表达（均 <0.01），胆固醇在促进肺腺癌细胞中MYADM表达的同时还促进Rac1和MCT1的表达以及Akt和c-Myc的磷酸化（均 <0.05）。免疫共沉淀实验结果显示，与正常的肺腺癌细胞相比，胆固醇处理的肺腺癌细胞中MYADM与Rac1相互作用水平升高［A549细胞：（191.0±26.7）%比（100.0±15.9）%， =0.007；H1975细胞：（170.0±27.5）%比（100.0±18.2）%， =0.021］。ChIP实验证实，胆固醇处理能增强c-Myc与MYADM和MCT1启动子之间的结合。动物实验显示，高胆固醇饲料促进肺腺癌细胞在裸鼠体内的转移，可诱导裸鼠肺组织中MYADM、MCT1和Rac1的表达以及Akt和c-Myc的磷酸化，而MYADM敲低可以抑制肺腺癌细胞在裸鼠体内的转移，抑制裸鼠肺组织中MYADM、MCT1和Rac1的表达以及Akt和c-Myc的磷酸化。 结论 胆固醇可能通过调节MYADM/Rac1/Akt/c-Myc/MCT1轴诱导肺腺癌细胞的增殖和转移。

来源：2025年第11期

《中华肿瘤》期刊编辑部

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