中华肿瘤杂志

作者：马刚,梁寒,张汝鹏,孙意

单位：国家恶性肿瘤临床医学研究中心　天津市肿瘤防治重点实验室　天津市恶性肿瘤临床医学研究中心　天津医科大学肿瘤医院胃部肿瘤科，天津300060,国家恶性肿瘤临床医学研究中心　天津市肿瘤防治重点实验室　天津市恶性肿瘤临床医学研究中心　天津医科大学肿瘤医院胃部肿瘤科，天津300060,国家恶性肿瘤临床医学研究中心　天津市肿瘤防治重点实验室　天津市恶性肿瘤临床医学研究中心　天津医科大学肿瘤医院胃部肿瘤科，天津300060

关键词：食管鳞状细胞癌;Ras相关结合蛋白23;黏着斑;侵袭;迁移

基金：国家自然科学基金E81602153，81974373

目的 探讨Ras相关结合蛋白23（RAB23）在食管鳞状细胞癌（简称食管鳞癌）细胞侵袭和迁移中的作用和机制。方法 采用实时荧光定量聚合酶链反应检测16例配对食管鳞癌及癌旁正常组织中RAB23 mRNA的表达。比较基因表达综合（GEO）数据库的GSE20347数据集中食管鳞癌和配对癌旁正常组织RAB23 mRNA的表达水平。免疫组织化学检测106例配对食管鳞癌和癌旁正常组织、33例淋巴结阳性与10例淋巴结阴性患者原发灶与淋巴结组织中RAB23蛋白含量。在食管鳞癌KYSE30和KYSE150细胞中瞬时敲降RAB23表达（转染si-RAB23-1和si-RAB23-9）或者稳定敲降RAB23表达（转染sh-RAB23），采用Western blot法验证RAB23敲降效率，采用细胞计数试剂盒8法和裸鼠皮下成瘤实验检测食管鳞癌细胞的增殖能力，采用Transwell实验和裸鼠尾静脉-肺转移实验检测食管鳞癌细胞的侵袭和迁移能力，采用细胞黏附实验检测食管鳞癌细胞的黏附能力，采用转录组测序技术分析RAB23敲降后对细胞转录谱的影响，并通过Western blot检测验证相关信号通路。结果 16例食管鳞癌组织中RAB23 mRNA表达水平为0.009 7±0.008 9，高于癌旁正常组织［0.003 2±0.003 7， =0.006］。对GEO数据库GSE20347数据集中食管鳞癌和配对癌旁正常组织表达谱的生信分析显示，食管鳞癌组织中RAB23 mRNA表达水平为4.30±0.25，高于癌旁正常组织（4.10±0.17， =0.037）。106例食管鳞癌组织中，51例RAB23低表达，55例RAB23高表达；而配对癌旁正常组织中，82例RAB23低表达，24例RAB23高表达，食管鳞癌组织中RAB23表达水平高于配对癌旁正常组织（ ＜0.001）。33例淋巴结阳性食管鳞癌组织中，1例RAB23低表达，32例RAB23高表达；10例淋巴结阴性的食管鳞癌组织中，3例RAB23低表达，7例RAB23高表达。淋巴结阳性食管鳞癌组织中RAB23表达水平高于淋巴结阴性食管鳞癌组织（ =0.024）。33例阳性淋巴结组织中，1例RAB23低表达，32例RAB23高表达，而10例阴性淋巴结组织中均为RAB23低表达。阳性淋巴结组织中RAB23表达水平高于阴性淋巴结组织（ ＜0.001）。瞬时或稳定敲降RAB23后，KYSE30细胞体外和体内的增殖能力无明显变化，KYSE30细胞的细胞侵袭和迁移能力下降，而KYSE150细胞仅侵袭能力下降，迁移能力无明显变化。sh-RAB23组KYSE30细胞黏附细胞的数量为（313.75±89.34）个，少于sh-NC组［（1 030.75±134.29）个， ＜0.001］。sh-RAB23组KYSE150细胞的黏附细胞数为（710.5±31.74）个，也少于sh-NC组［（1 005.75±61.09）个， ＜0.001］。转录组测序分析显示，敲降RAB23后，si-RAB23-1组和si-RAB23-9组KYSE30细胞中黏着斑相关信号通路均被削弱，sh-RAB23组KYSE30和KYSE150细胞中p-FAK和p-paxillin表达水平降低。 结论 RAB23在食管鳞癌组织中高表达，与淋巴结转移有关。敲低RAB23表达后能够削弱黏着斑相关信号通路，进而抑制食管鳞癌细胞的侵袭、迁移和黏附。

来源：2024年第02期

《中华肿瘤》期刊编辑部

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