中华肿瘤杂志

作者：曾铖,张剑

单位：复旦大学附属肿瘤医院肿瘤内科，复旦大学上海医学院肿瘤学系，上海200032,复旦大学附属肿瘤医院肿瘤内科，复旦大学上海医学院肿瘤学系，上海200032复旦大学附属肿瘤医院肿瘤内科，复旦大学上海医学院肿瘤学系，上海200032

关键词：乳腺肿瘤;金属有机框架;整合素αv;基因转染;小干扰RNA;细胞外基质

目的 开发一种新型递送策略，利用金属有机框架（MOF）负载针对整合素αv（ITGAV）的小干扰RNA siITGAV，以克服基质屏障，进而增强乳腺癌内药物递送及免疫可及性。方法 构建MOF@siITGAV颗粒，对其进行材料表征。通过细胞摄取实验观察乳腺癌4T1细胞对MOF@siITGAV的摄取情况，细胞计数试剂盒8法检测MOF@siITGAV的细胞毒性。设空白对照组、游离siITGAV组和MOF@siITGAV组，采用实时荧光定量聚合酶链反应检测各组4T1细胞中ITGAV mRNA的表达，采用Western blot检测ITGAV蛋白的表达，采用酶联免疫吸附试验检测TGF-β1的含量。采用3D球体穿透实验观察MOF@siITGAV穿透4T1细胞球的能力。建立三阴性乳腺癌小鼠模型，观察MOF@siITGAV对移植瘤生长及小鼠心、肝、脾、肺、肾等主要脏器的影响，采用免疫组化染色检测肿瘤组织中Ⅰ型胶原蛋白和CD8的表达。结果 成功构建MOF@siITGAV颗粒，粒径为（198.0±3.3）nm，电位为-（20.2±0.4）mV。4T1细胞能有效摄取MOF@siITGAV，并触发siRNA的有效释放，MOF@siITGAV组细胞中ITGAV mRNA和蛋白表达水平、TGF-β1的表达水平均显著下调［相对于空白对照组，游离siITGAV组和MOF@siITGAV组4T1细胞中ITGAV mRNA相对表达水平分别为（109.9±19.0）%和（46.5±11.3）%；空白对照组、MOF@siNC组和MOF@siITGAV组TGF-β1浓度分别为（474.5±34.4）pg/ml、（437.2±16.5）pg/ml和（388.4±14.4）pg/ml］。MOF@siITGAV在4T1细胞球中的穿透能力更强，对4T1细胞无明显杀伤效应，0、10、20、40、80和160 μg/ml MOF@siITGAV分别处理4T1细胞24 h，细胞活性分别为（99.7±3.5）%、（98.2±5.2）%、（97.3±6.6）%、（92.1±8.1）%和（92.4±4.1）%。MOF@siITGAV能有效抑制小鼠乳腺癌移植瘤的生长，给药15 d后，空白对照组、MOF@siNC组和MOF@siITGAV组小鼠的肿瘤体积分别为（691.1±193.0）mm 、（652.7±306.5）mm 和（135.3±41.9）mm ，MOF@siITGAV组小鼠的肿瘤体积小于空白对照组（ =0.025）。与空白对照组和MOF@siNC组相比，MOF@siITGAV组小鼠肿瘤组织中Ⅰ型胶原蛋白的含量明显减少，CD8阳性细胞明显增多，心、肝、脾、肺、肾等主要脏器未见明显异常。 结论 ITGAV可以破坏乳腺癌的ECM，改善药物瘤内递送，促进免疫细胞浸润。

来源：2024年第05期

《中华肿瘤》期刊编辑部

查看中华肿瘤杂志2024年第05期