中华肿瘤杂志

作者：王冲,霍研锟,李梦亚,李潺,申晓辉,王树娟,刘延方,姜中兴

单位：郑州大学第一附属医院血液科，郑州　450052,郑州大学第一附属医院血液科，郑州　450052,郑州大学第一附属医院血液科，郑州　450052,郑州大学第一附属医院血液科，郑州　450052,郑州大学第一附属医院血液科，郑州　450052,郑州大学第一附属医院血液科，郑州　450052,郑州大学第一附属医院血液科，郑州　450052,郑州大学第一附属医院血液科，郑州　450052郑州大学第一附属医院血液科，郑州　450052

关键词：妇科肿瘤;Hela细胞;circ_0000263;miR-338-3p;端粒酶逆转录酶;放射敏感性;细胞凋亡

基金：国家自然科学基金资助项目EU1804191

目的 探讨circ_0000263对HeLa细胞活性、凋亡、端粒酶活性以及放射敏感性的影响及其分子机制。方法 采用实时荧光定量聚合酶链反应检测circ_0000263和miR-338-3p mRNA表达水平，细胞克隆形成实验检测细胞存活情况，细胞计数试剂盒8检测细胞增殖，流式细胞术检测细胞凋亡，Western blot法检测蛋白增殖细胞核抗原（PCNA）、Cleaved-casp3、端粒酶逆转录酶（TERT）的表达，双荧光素酶实验检测circ_0000263和miR-338-3p、miR-338-3p和TERT的靶向关系，端粒重复序列扩增酶联免疫吸附试验检测端粒酶活性。结果 Hela细胞中circ_0000263呈高表达，miR-338-3p呈低表达，TERT呈高表达，射线辐射的HeLa细胞中circ_0000263也呈高表达（均 ＜0.05）。敲减circ_0000263可抑制HeLa细胞克隆形成和细胞增殖能力，增强HeLa细胞的辐射敏感性和细胞凋亡。敲减circ_0000263可降低HeLa细胞中PCNA蛋白表达水平，增强HeLa细胞中Cleaved-casp3蛋白表达水平（ ＜0.05）。si-circ_0000263（si-circ）组细胞凋亡率为（13.19±1.12）%，高于si-NC组［（6.80±0.62）%， ＜0.05］；si-circ+4 Gy组细胞凋亡率为（24.82±1.57）%，高于si-NC+4 Gy组［（17.00±0.96）%， ＜0.05］。circ_0000263靶向调控miR-338-3p，miR-338-3p靶向调控TERT。miR-338-3p在Hela细胞中呈低表达，敲减circ_0000263可提高HeLa细胞中miR-338-3p表达水平。circ_0000263通过miR-338-3p调控TERT表达，抑制端粒酶活性。miR-338-3p/TERT均能恢复抑制circ_0000263对Hela细胞放射敏感性的影响。si-circ+anti-NC组细胞凋亡率为（27.37±0.89）%，高于si-circ+anti-miR-338-3p组［（18.22±1.18）%， ＜0.05］；si-circ+vector组细胞凋亡率为（27.55±0.48）%，高于si-circ+TERT组［（20.10±0.68）%， ＜0.05］。经4 Gy射线照射72 h后，si-circ+anti-NC组细胞存活分数（0.41±0.02）低于si-circ+anti-miR-338-3p组（0.66±0.03， ＜0.05）；si-circ+vector组细胞存活分数（0.42±0.05）低于si-circ+TERT组（0.70±0.03， ＜0.05）。 结论 抑制circ_0000263的表达通过调控miR-338-3p/TERT抑制Hela细胞增殖，促进细胞凋亡，抑制端粒酶活性，提高癌细胞的放射敏感性。

来源：2024年第07期

《中华肿瘤》期刊编辑部

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