中华肿瘤杂志

作者：聂小蒙,董丹凤,林佳菲,吴蓓颖,蔡刚

单位：海军军医大学第一附属医院呼吸与危重症医学科，上海200433

关键词：肺肿瘤;表皮生长因子受体;肿瘤坏死因子受体相关因子4;自身磷酸化

基金：上海市科委自然科学基金E19ZR1431900

目的 探讨肿瘤坏死因子受体相关因子4（TRAF4）促进表皮生长因子受体（EGFR）异常激活的作用及其对肺癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法 收集2015年1月至2017年5月于海军军医大学第一附属医院行肺腺癌切除患者的肿瘤组织，免疫组化检测肺癌组织中TRAF4和Ki-67的表达，实时荧光定量PCR检测Cyclin D和Vimentin mRNA的表达。通过异基因移植模型研究TRAF4对肺癌A549细胞的肿瘤生长能力的影响，采用细胞计数试剂盒8和BrdU实验检测TRAF4或EGFR对肿瘤增殖能力的影响，Transwell实验检测肿瘤细胞转移及侵袭能力。构建不同的TRAF4和EGFR结构域缺失表达载体转染细胞，通过免疫共沉淀实验研究TRAF4和EGFR相互作用方式。结果 非小细胞肺癌（NSCLC）组织中TRAF4的表达与Ki-67、Cyclin D和Vimentin的表达呈正相关（ 分别为0.438、0.695和0.736，均 ＜0.01）。NSCLC患者肿瘤组织免疫组化检测结果显示，高表达TRAF4的组织同时高表达Ki-67。TRAF4高表达（TRAF4阳性率＞30%）患者较TRAF4低表达患者（TRAF4阳性率≤30%）的无进展生存时间缩短（中位无进展生存时间分别为12和19个月， =0.034）。Traf4 细胞较Traf4 细胞增殖能力减弱，形成肿瘤体积小（ ＜0.05）。对形成的肿瘤组织进行Ki-67染色，Cyclin D和Vimentin mRNA表达水平检测，结果显示，Traf4 细胞形成的肿瘤组织中Ki-67表达水平［（45.6±8.7）%］低于Traf4 细胞形成的肿瘤组织［（62.3±10.3）%， =0.015］，Cyclin D mRNA表达水平（1.01±0.15）和Vimentin mRNA表达水平（1.01±0.12）均低于后者（分别为3.41±0.32和3.12±0.18，均 ＜0.05）。Western blot结果显示，随着细胞内TRAF4表达水平升高，无论是野生型还是活化突变型细胞，EGFR的磷酸化水平均明显升高。基因敲除EGFR后，A549细胞相对增殖、迁移和侵袭能力减弱（均 ＜0.01）。免疫共沉淀实验显示，TRAF4通过TRAF结构域与EGFR的近膜区肽段结合，TRAF4过表达条件下，EGFR分子之间的相互结合增强。增加TRAF4表达能促进EGFR分子磷酸化及下游信号的活化。 结论 TRAF4在 NSCLC组织及肿瘤细胞中表达升高，促进肿瘤的增殖、迁移与侵袭。TRAF4直接与EGFR分子相结合，通过促进EGFR分子之间的相互作用增强其自身磷酸化，激活下游信号通路。

来源：2024年第10期

《中华肿瘤》期刊编辑部

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