中华肿瘤杂志

北大核心,CA,JST,CSCD,WJCI

国内刊号:11-2152/R

国际刊号:0253-3766

中华肿瘤杂志2023年第03期:长链非编码RNA二磷酸腺苷依赖的葡萄糖激酶反义RNA1通过靶向miR-200b-5p促进视网膜母细胞瘤细胞增殖抑制凋亡

发布日期:

作者:邢枫,李永明,高明敏

关键词:视网膜母细胞瘤;二磷酸腺苷依赖的葡萄糖激酶反义RNA1;miR-200b-5p;细胞增殖;细胞凋亡

目的 探讨长链非编码RNA二磷酸腺苷依赖的葡萄糖激酶反义RNA1(lnc RNA ADPGK-AS1)对视网膜母细胞瘤细胞增殖及凋亡的影响及其可能的作用机制。方法 收集2020年2—6月河南省立眼科医院收治的31例视网膜母细胞瘤患者的肿瘤组织及其相应癌旁正常组织,采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)法检测视网膜母细胞瘤组织和癌旁正常组织中lncRNA ADPGK-AS1、miR-200b-5p的表达水平。体外培养人视网膜上皮细胞ARPE-19、人视网膜母细胞瘤细胞Y-79和WERI-Rb-1,qRT-PCR法检测lncRNA ADPGK-AS1、miR-200b-5p的表达水平。以Y-79细胞为研究对象,随机分组si-con组、si-lncRNA ADPGK-AS1组、miR-con组、miR-200b-5p组、si-lncRNA ADPGK-AS1+anti-miR-con组、si-lncRNA ADPGK-AS1+anti-miR-200b-5p组。四甲基偶氮唑蓝法、平板克隆形成实验与流式细胞术分别检测各组细胞的增殖、克隆及凋亡情况,双荧光素酶报告实验检测lncRNA ADPGK-AS1与miR-200b-5p的靶向关系,Western blot法检测Cleaved-caspase-3蛋白的表达水平。结果 视网膜母细胞瘤组织中lncRNA ADPGK-AS1的表达水平高于癌旁正常组织,miR-200b-5p的表达水平低于癌旁正常组织(均 <0.05);Y-79、WERI-Rb-1细胞中lncRNA ADPGK-AS1的表达水平高于ARPE-19细胞,miR-200b-5p的表达水平低于ARPE-19细胞(均 <0.05)。si-lncRNA ADPGK-AS1组细胞吸光度( )值(0.53±0.05)、细胞克隆形成数[(57.00±4.13)个]低于si-con组[分别为1.06±0.09和(114.00±8.03)个,均 <0.05],细胞凋亡率[(25.43±1.94)%]高于si-con组[(7.93±0.68)%, <0.05],Cleaved-caspase-3蛋白水平高于si-con组( <0.05)。miR-200b-5p组细胞 值(0.57±0.05)、细胞克隆形成数[(64.00±5.13)个]低于miR-con组[分别为1.05±0.08和(118.00±10.02)个,均 <0.05)],细胞凋亡率[(23.15±1.62)%]高于miR-con组[(7.89±0.71)%, <0.05],Cleaved-caspase-3蛋白水平高于miR-con组( <0.05)。lncRNA ADPGK-AS1可靶向调控miR-200b-5p的表达。si-lncRNA ADPGK-AS1+anti-miR-200b-5p组细胞 值(1.25±0.10)、细胞克隆形成数[(125.00±10.03)个]高于si-lncRNA ADPGK-AS1+anti-miR-con组[分别为0.53±0.04和(54.00±4.39)个,均 <0.05],细胞凋亡率[(9.76±0.71)%]低于si-lncRNA ADPGK-AS1+anti-miR-con组[(25.38±1.53)%, <0.05],Cleaved-caspase-3蛋白水平低于si-lncRNA ADPGK-AS1+anti-miR-con组( <0.05)。 结论 抑制lncRNA ADPGK-AS1表达可通过靶向调控miR-200b-5p表达而抑制视网膜母细胞瘤细胞增殖及克隆形成,并可诱导细胞凋亡。

来源:2023年第03期

《中华肿瘤》期刊编辑部

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