中华肿瘤杂志

作者：杨富丽,陈欣,郑斐,刘相叶,孙娜,李容庆,蒋振,韩静,杨晶

关键词：结肠肿瘤;Alisertib耐药;miRNA－125b;p53;上皮－间质转化;糖酵解

基金：江苏省高等学校自然科学研究项目重大项目\u003C\u002Ffunding-source\u003E\u003Caward-id\u003E17KJA320010

目的 探讨Alisertib耐药的分子机制并寻找Alisertib耐药的潜在靶点。方法 用Alisertib连续处理结肠癌细胞系建立耐药细胞株并命名为HCT－8－7T细胞，将HCT－8－7T细胞及人结肠癌细胞系HCT－8接种至免疫缺陷小鼠体内，观察小鼠其他器官转移瘤的情况。采用细胞克隆实验及Transwell迁移实验检测细胞的增殖及迁移能力，采用Seahorse分析仪检测细胞糖酵解及谷氨酰胺代谢能力的差异，Western blot和实时荧光定量聚合酶链反应检测糖酵解及上皮－间质转化(EMT)标志物相关蛋白表达水平及mRNA水平。结果 接种HCT－8－7T细胞的小鼠肝脏、肺脏、肾、卵巢等转移灶数量多于接种HCT－8细胞的小鼠(均<0.05)。HCT－8－7T细胞腺嘌呤核苷三磷酸水平[(0.10±0.01)mmol/L]、糖酵解水平[(81.77±8.21)mpH/min]及糖酵解能力[(55.50±3.48)mpH/min]均高于HCT－8细胞[分别为(0.04±0.01)mmol/L、(27.77±2.55)mpH/min和(14.00±1.19)mpH/min，均<0.05]。HCT－8－7T细胞中p53蛋白表达水平及mRNA表达水平低于HCT－8细胞(均<0.05)。HCT－8－7T细胞中miR－125b表达水平(2.21±0.12)高于HCT－8细胞(1.00±0.00，<0.001)。在HCT－8－7T细胞中，过表达p53导致细胞克隆数[(162.00±24.00)个]及细胞迁移率[(18.53±5.67)%]低于空白对照组[分别为(274.70±40.50)个和(100.00±29.06)%，均<0.05]。miR－125b mimic组HCT－8－7T细胞糖酵解水平[(25.28±9.51)mpH/min]低于空白对照组[(54.38±12.70)mpH/min，<0.05]。与空白对照组HCT－8－7T细胞比较，miR－125b mimic组HCT－8－7T细胞中p53和β－catenin蛋白水平升高，PFK1和HK1蛋白水平降低(均<0.05)。结论 miR－125b沉默p53是导致Alisertib耐药的机制之一，靶向miR－125b是克服Alisertib耐药的潜在可用之策。

来源：2023年第06期

《中华肿瘤》期刊编辑部

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