中华肿瘤杂志

作者：全艳春,王利莹,王增勇,高伟,车峰远

关键词：胶质瘤;胰岛再生源蛋白3A;细胞增殖;细胞迁移;磷酯酰肌醇－3－激酶/Akt信号通路

基金：中国博士后科学基金E2020M672105

目的 探讨胰岛再生源蛋白3A(REG3A)对胶质瘤细胞增殖和迁移的影响及其分子作用机制。方法 收集2017年10月17日至2018年10月18日于临沂市人民医院行手术治疗的10例胶质瘤患者的癌及癌旁组织，低级别和高级别胶质瘤各5例。体外培养不同胶质瘤细胞株(SF295、U251、TG905、A172和CRT)及原代胶质瘤细胞株PT1，采用实时荧光定量聚合酶链反应和Western blot检测组织标本及各细胞株中REG3A的mRNA和蛋白表达水平。通过脂质体转染si－REG3A至TG905细胞敲低REG3A的表达，通过慢病毒包装REG3A质粒感染SF295细胞上调REG3A的表达，使用REG3A重组蛋白和Akt抑制剂单独或联合处理胶质瘤细胞，采用细胞计数试剂盒8法检测细胞增殖能力，细胞划痕实验检测细胞迁移能力，Western blot法检测细胞中N－cadherin、vimentin和磷酸化Akt(p－Akt)的表达情况。结果 实时荧光定量聚合酶链反应(RT－qPCR)结果显示，U251、TG905、CRT、A172和PT－1细胞中REG3AmRNA的表达水平分别为2.129±0.13、2.22±0.59、5.02±0.31、6.62±1.34和9.18±0.61，高于SF295细胞(1.00±0.18，均 <0.001)。高级别胶质瘤组织中REG3AmRNA的表达水平为3.18±2.92，高于癌旁组织(1.00±1.14， ＝0.031)和低级别胶质瘤组织(0.90±0.67， ＝0.014)。Western blot和免疫组化检测结果与RT－qPCR结果一致。si－REG3A组TG905细胞的迁移率为(60.57±5.30)%，低于空白对照组[(79.65±12.09)%， ＝0.076]和si－NC组[(84.18±13.63)%， ＝0.038]。REG3A质粒转染组SF295细胞的迁移率为(96.05±6.41)%，高于空载转染组[(74.47±8.23)%， ＝0.021]。REG3A重组蛋白能够上调SF295细胞中N－cadherin、vimentin和p－Akt的表达。与对照组[(100.00±2.53)%]相比，REG3A重组蛋白组的增殖率[(117.70±10.24)%]明显提高，REG3A重组蛋白+Akt抑制剂组的增殖率[(98.31±3.64)%]明显低于REG3A重组蛋白组( ＝0.017)。REG3A重组蛋白+Akt抑制剂组的迁移率为(63.35±4.06)%，低于REG3A重组蛋白组[(89.26±11.07)%， ＝0.019]。 结论 REG3A能够通过激活磷酯酰肌醇－3－激酶/Akt信号通路促进人胶质瘤细胞的增殖和迁移。

来源：2023年第08期

《中华肿瘤》期刊编辑部

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