中华肿瘤杂志

作者：贾云泷,赵妍,甄书漫,程子硕,郑博阳,刘月平,刘丽华

关键词：肺肿瘤;腺癌;溶质运载体家族7成员11;吉非替尼;耐药;铁死亡

基金：国家自然科学基金面上项目\u003C\u002Ffunding-source\u003E\u003Caward-id\u003E81871894

目的 筛选促进表皮生长因子受体(EGFR)基因19号外显子突变肺腺癌吉非替尼耐药细胞PC9/GR的关键基因，探讨下调溶质运载体家族7成员11(SLC7A11)对PC9/GR细胞吉非替尼耐药性的影响及其机制。方法 采用RNA微阵列技术检测PC9细胞和PC9/GR细胞的基因表达，使用R语言的limma包筛选差异基因并使用clusterProfiler包进行京都基因与基因组百科全书(KEGG)基因富集分析。使用Western blot法检测SLC7A11蛋白在PC9和PC9/GR细胞中的表达，采用慢病毒包装体系构建下调SLC7A11的短发卡RNA(shRNA)和阴性对照shRNA慢病毒并对PC9/GR细胞进行转染，实时荧光定量聚合酶链反应检测shRNA对SLC7A11 mRNA的下调效率，细胞计数试剂盒8法检测吉非替尼对PC9/GR细胞的杀伤能力，线粒体红色荧光探针和丙二醛(MDA)检测试剂盒检测PC9/GR细胞中吉非替尼介导的铁死亡，免疫组化检测SLC7A11在携带EGFR基因19号外显子突变的晚期肺腺癌患者(选取2016—2020年于河北医科大学第四医院接受EGFR酪氨酸激酶抑制剂作为一线治疗方案的晚期肺癌患者36例)肿瘤组织中的表达，绘制Kaplan－Meier生存曲线分析SLC7A11与患者无进展生存时间(PFS)的相关性。结果 RNA微阵列结果显示，PC9和PC9/GR细胞的差异表达基因共2 888个，KEGG富集分析结果显示，铁死亡相关基因是PC9和PC9/GR细胞差异表达基因的主要富集区域之一，共包含13个基因，其中SLC7A11表达差异最大。Western blot结果显示，PC9/GR细胞中SLC7A11蛋白的相对表达水平为0.76±0.03，高于PC9细胞(0.19±0.02，<0.001)。吉非替尼干预sh－SLC7A11组和sh－NC组PC9/GR细胞的半数抑制浓度值分别为35.08和64.01 μmol/L。吉非替尼干预后，与sh－NC组比较，sh－SLC7A11组PC9/GR细胞的线粒体荧光强度降低(分别为213.77±26.50和47.88±4.55，<0.001)，MDA含量增加[分别为(15.43±1.60)μmol/mg和(82.18±7.77) μmol/mg，<0.001]。SLC7A11低表达组(＝18)患者的中位PFS为16.77个月，优于SLC7A11高表达组(＝18)患者(9.14个月，<0.001)。结论 下调SLC7A11能够通过促进铁死亡提高PC9/GR细胞对吉非替尼的敏感性。

来源：2023年第09期

《中华肿瘤》期刊编辑部

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