中华肿瘤杂志

作者：李伟,赵绍林,郑萍,史沛芹,周颖,张婷,霍娟,杨晋

关键词：胃肿瘤;间充质干细胞;巨噬细胞;极化

基金：国家自然科学基金青年科学基金项目E81402280

目的 探讨胃癌微环境中肿瘤来源间充质干细胞对巨噬细胞M2亚型极化的调节作用及机制。方法 胃癌及癌旁正常组织来源于2018年于连云港市第一人民医院行胃癌切除的患者(4例)。将THP-1诱导分化来源的巨噬细胞与胃癌来源间充质干细胞(GC-MSCs)进行体外共培养，细胞分为对照组(Mac组)、细胞上清处理组(Mac+GC-MSC-CM组)、Mac+GC-MSC-TW组、Mac+IL-6-blocked-GC-MSC-CM组、Mac+IL-8-blocked-GC-MSC-CM组和Mac+IL-6/IL-8-blocked-GC-MSC-CM组。采用实时荧光定量聚合酶链反应、流式细胞术和Luminex液态芯片技术，分别评价巨噬细胞中M2亚型相关基因、细胞表面标记蛋白以及细胞因子谱的表达情况。利用Luminex液态芯片技术检测并筛选GC-MSCs中可能发挥诱导巨噬细胞向M2亚型极化作用的关键细胞因子，并采用中和抗体试验进行验证。Western blot法检测GC-MSCs不同处理条件下，巨噬细胞中M2亚型极化相关信号通路蛋白表达情况。结果 Mac+GC-MSC-CM组巨噬细胞中M2亚型相关基因Ym-1和Fizz-1表达水平分别为1.53±0.32和13.22±1.05，均高于Mac组(分别为1.00±0.05和1.21±0.38，均 <0.05)，iNOS基因表达水平(0.60±0.41)低于Mac组(1.06±0.38, ＝0.023)。Mac+GC-MSC-TW组巨噬细胞中Ym-1和Fizz-1基因表达水平分别为1.47±0.09和13.16±2.77，均高于Mac组(分别为1.00±0.05和1.21±0.38，均 <0.05)，iNOS基因表达水平(0.56±0.03)低于Mac组(1.06±0.38， ＝0.026)。Mac+GC-MSC-CM组和Mac+GC-MSC-TW组巨噬细胞中CD163 和CD204 细胞比例分别为3.80%和4.40%，均高于Mac组(0.60%)。Mac+GC-MSC-CM组巨噬细胞中白细胞介素10(IL-10)、IL-6、单核细胞趋化蛋白1和血管内皮生长因子的表达水平分别为(592.60±87.52)pg/ml、(1 346.80±64.70)pg/ml、(11 256.00±29.03)pg/ml和(1 463.90±66.67)pg/ml，均高于Mac组[分别为(41.03±2.59)pg/ml、(17.35±1.79)pg/ml、(5 213.30±523.71)pg/ml和(267.12±12.06)pg/ml，均 <0.05]，肿瘤坏死因子α、IP-10、RANTES和巨噬细胞炎症蛋白1α的表达水平分别为(95.57±9.34)pg/ml、(410.48±40.68)pg/ml、(6 967.30±1.29)pg/ml和(1 538.70±283.04)pg/ml，均低于Mac组[分别为(138.01±24.31)pg/ml、(1 298.60±310.50)pg/ml、(14 631.00±4.21)pg/ml和(6 633.20±1.47)pg/ml，均 <0.05]。IL-6、IL-8在GC-MSCs中的表达水平分别为(11 185.02±2.82)pg/ml和(12 718.03±370.17)pg/ml，均高于胃癌癌旁间充质干细胞[分别为(270.71±59.38)pg/ml和(106.04±32.84)pg/ml，均 <0.05]。Mac+IL-6-blocked-GC-MSC-CM和Mac+IL-8-blocked-GC-MSC-CM组巨噬细胞中CD86 细胞的比例(分别为28.80%和31.40%)均高于Mac+GC-MSC-CM组(24.70%)。Mac+IL-6-blocked-GC-MSC-CM和Mac+IL-8-blocked-GC-MSC-CM组中CD204 细胞比例(分别为9.90%和8.70%)均低于Mac+GC-MSC-CM组(13.70%)。Mac+GC-MSC-CM组巨噬细胞M2亚型极化相关信号通路蛋白p-JAK2和p-STAT3表达水平分别为0.86±0.01和1.08±0.01，均高于Mac组(分别为0.50±0.01和0.82±0.01，均 <0.05)，Mac+IL-6-blocked-GC-MSC-CM组巨噬细胞中p-JAK2蛋白表达水平(0.47±0.02)低于Mac+GC-MSC-CM组(0.86±0.01， <0.05)。Mac+IL-8-blocked-GC-MSC-CM组巨噬细胞中p-JAK2和p-STAT3蛋白表达水平分别为0.50±0.01和0.85±0.01，均低于Mac+GC-MSC-CM组(分别为0.86±0.01和1.08±0.01，均 <0.05)。Mac+IL-6/IL-8-blocked-GC-MSC-CM组细胞中p-JAK2和p-STAT3蛋白表达水平分别为0.37±0.01和0.65±0.01，均低于Mac+GC-MSC-CM组(均 <0.05)。 结论 GC-MSCs通过分泌高水平IL-6和IL-8因子促进巨噬细胞中JAK2/STAT3信号通路活化，从而有效诱导胃癌微环境中巨噬细胞向具有促肿瘤作用的M2亚型发生极化。

来源：2022年第07期

《中华肿瘤》期刊编辑部

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