中华肿瘤杂志

作者：马德健,曹珍,王贲士,孙燕来

关键词：结直肠肿瘤;肝细胞生长因子受体;信号通路;生物学特性

基金：济南临床医学科技创新计划项目E201805091

目的 探讨沉默肝细胞生长因子受体c－Met表达对结肠癌细胞生物学特性的影响。方法 利用HCT116结肠癌细胞，通过RNA干扰技术建立c－Met瞬时转染的细胞模型，同时设阴性对照(siRNA－NC)和空白对照。采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT－qPCR)和Western blot检测细胞中c－Met的表达，通过细胞增殖实验、细胞周期和凋亡测定、细胞侵袭实验、细胞迁移实验等观察沉默c－Met对HCT116结肠癌细胞生物学特性的影响。结果 siRNA－Met组、siRNA－NC组和空白对照组细胞c－Met mRNA的表达水平分别为0.32±0.26、1.05±0.23和1.01±0.03，c－Met蛋白的表达水平分别为0.24±0.03、1.18±0.11和1.23±0.06，siRNA－Met组均显著降低(均 <0.05)。转染后72 h，siRNA－Met组的吸光度值为1.13±0.05，低于siRNA－NC组(1.53±0.07， <0.01)和空白对照组(1.48±0.08， <0.01)。siRNA－Met组G /M期细胞比例为(14.65±1.41)%，高于siRNA－NC组[(5.63±0.71)%， <0.05]和空白对照组[(5.07±0.70)%， <0.05]，并且siRNA－Met转染后，细胞周期调节蛋白Cdc25c和cyclin B1的表达水平显著下降。siRNA－Met组细胞凋亡率为(5.85±0.35)%，显著高于siRNA－NC组[(0.91±1.14)%， <0.05]和空白对照组[(1.00±0.17)%， <0.05]，并且siRNA－Met转染后，凋亡相关蛋白Bcl－2的表达水平显著下降，Bcl－2关联X蛋白(BAX)表达水平显著升高。siRNA－Met组的细胞迁移率为(51.33±8.62)% ，显著低于siRNA－NC组[(102.33±6.43)%, <0.05]和空白对照组[(100.00±3.72)%， <0.05]。siRNA－Met组穿透至基底膜下室面的细胞数为(47.50±10.60)个，少于siRNA－NC组[(102.50±10.61)个， <0.05]和空白对照组[(100.00±5.33)个， <0.05]，并且siRNA－Met转染后，侵袭相关蛋白基质金属蛋白酶2(MMP－2)和MMP－9的表达水平显著下降。 结论 c－Met在维持结肠癌细胞生物学特性中发挥重要作用，c－Met抑制剂可能在结肠癌治疗中具有重要价值。

来源：2020年第05期

《中华肿瘤》期刊编辑部

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