国内刊号:11-2152/R
国际刊号:0253-3766
发布日期:
作者:吴云,王一鹏,马杰,张永宏,孙焕芹,孙坚萍,王子康,徐杰,代艳超,李宁
关键词:肝细胞癌;高尔基体糖蛋白73;抗体筛选;液态芯片
基金:首都临床特色应用研究与成果推广EZ151100004015081
目的 构建高尔基体糖蛋白73(GP73)的液态芯片检测体系并评价其检测性能。方法 制备并纯化5株抗GP73的单克隆抗体,采用酶联免疫吸附试验双抗夹心法进行抗体配对筛选。应用筛选到的抗体对构建Luminex液态芯片检测体系,并对该检测体系进行分析性能评估。应用该体系检测正常对照、慢性乙型肝炎和肝细胞癌血液样本各30例,比较3组间GP73浓度的差异。结果 制备并纯化了5株抗GP73单克隆抗体,配对筛选成功5对。应用8F10D1和10B9F11抗体对成功构建了GP73的Luminex液态芯片检测体系。该检测体系的灵敏度为0.25 ng/ml,线性检测范围为0.25~100 ng/ml,特异度较好,批内精密度<8%,批间精密度<9%,回收率为83%~92%,线性稀释效应的线性回归方程为y=1.141x+6.436( =0.998 4, <0.001)。正常对照组、慢性乙肝组和肝细胞癌组血液样本的GP73浓度分别为42.8(38.68,55.90)ng/ml、61.49(43.59,81)ng/ml和122.78(49.36l,264.55)ng/ml。肝细胞癌组的GP73浓度高于慢性乙肝组和正常对照组(均 <0.05),慢性乙肝组的GP73浓度高于正常对照组( <0.05)。 结论 成功构建了GP73的液态芯片检测体系,为GP73检测在临床上的应用奠定了基础。
来源:2019年第5期
《中华肿瘤》期刊编辑部