中华肿瘤杂志

作者：刘慧娟,李桂玲,雷平冲

关键词：miR-144;MYCN;小儿神经母细胞瘤;增殖;凋亡;耐药

目的 探讨miR-144对神经母细胞瘤细胞增殖凋亡和顺铂耐药的影响及其机制。方法 采用实时荧光定量PCR法检测神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y、SK-N-SH和人脐静脉内皮细胞HUVEC中miR-144、MYCN mRNA的表达。将miR-NC、miR-144 mimics、si-NC、si-MYCN、miR-144 mimics＋pcDNA和miR-144 mimics＋pcDNA-MYCN转染至SH-SY5Y细胞，四甲基偶氮唑蓝法检测细胞的半数抑制率(IC )和增殖情况，Western blot检测细胞中MYCN、p21、Cyclin D1、Bax和Bcl-2蛋白的表达，流式细胞术检测细胞的凋亡，双荧光素酶报告基因检测实验检测细胞的荧光活性。 结果 与人脐静脉内皮细胞HUVEC(1.01±0.03)比较，神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y中miR-144的表达(0.32±0.03)降低，MYCN mRNA和蛋白的表达水平(分别为2.42±0.18和1.98±0.15)升高，顺铂对SH-SY5Y细胞的IC 为9.16 μg/ml。miR-144组和miR-NC组SH-SY5Y细胞在490 nm波长处的吸光度值分别为0.30±0.03和0.46±0.03，凋亡率分别为(26.94±2.01)%和(9.68±0.52)%。顺铂的IC 分别为2.95±0.26和9.23±0.61，差异均有统计学意义(均 >0.05)。miR-NC组和miR-144组SH-SY5Y细胞中p21蛋白的表达水平分别为2.67±0.19和1.01±0.07，Cyclin D1蛋白的表达水平分别为0.41±0.04和1.00±0.06，Bax蛋白的表达水平分别为2.12±0.21和1.00±0.05，Bcl-2蛋白的表达水平分别为0.18±0.01和1.00±0.06，差异均有统计学意义(均 <0.05)。敲减原癌基因MYCN与过表达miR-144对SH-SY5Y细胞的作用类似。miR-144可明显抑制野生型MYCN细胞的荧光活性，并负向调控MYCN的表达；过表达MYCN可逆转miR-144对SH-SY5Y细胞的增殖抑制，促进凋亡及对顺铂的增敏作用。 结论 miR-144可抑制神经母细胞瘤细胞的增殖，促进凋亡，增强对顺铂的敏感性，其机制可能与靶向MYCN有关，可为神经母细胞瘤的治疗提供依据。

来源：2019年第7期

《中华肿瘤》期刊编辑部

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