国内刊号:11-2152/R
国际刊号:0253-3766
发布日期:
作者:戴菡珏,徐晶晶,李文静,国风
关键词:胃肿瘤;肿瘤坏死因子受体相关因子2;细胞生长;迁移;侵袭;核转录因子κB
基金:苏州市科技计划计划项目ESS201875
目的 探讨肿瘤坏死因子受体相关因子2(TRAF2)对胃癌AGS细胞生长、迁移和侵袭等细胞生物学行为的影响及机制。方法 构建低表达TRAF2的胃癌AGS细胞株(AGS-siTRAF2),采用xCELLigence系统和细胞活力实验检测细胞的生长和增殖情况。采用流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期,采用xCELLigence系统和Transwell实验检测细胞的迁移和侵袭能力。采用Western blot法和TransAM法检测低表达TRAF2对AGS细胞核转录因子κB(NF-κB)信号通路的影响。采用免疫组化法检测胃癌组织中TRAF2的表达,分析TRAF2表达与胃癌临床病理特征的关系和对患者生存的影响。结果 xCELLigence系统动态检测结果显示,从8 h开始,AGS-siTRAF2细胞的生长速度明显慢于AGS-sictrl细胞。细胞活力实验显示,培养24、48和72 h时,AGS-siTRAF2细胞的吸光度( )值分别为51 296.00±2 631.06、68 389.25±6 703.21和65 559.50±6 339.22,均显著低于AGS-sictrl细胞(均 <0.001)。流式细胞术检测结果显示,培养24、48和72 h时,AGS-siTRAF2细胞凋亡率分别为(1.42±0.07)%、(2.98±0.11)%和(1.56±0.03)%,均显著高于AGS-sictrl细胞(均 <0.05);AGS-siTRAF2细胞S期占(23.57±1.12)%,对照组为(19.49±1.19)%,差异有统计学意义( =0.012)。xCELLigence系统检测显示,从3 h开始,AGS-siTRAF2细胞的迁移能力低于AGS-sictrl细胞。Transwell实验检测结果显示,培养24 h后,AGS-sictrl的细胞数为(121.7±6.7)个,AGS-siTRAF2的细胞数为(84.0±6.6)个,AGS-siTRAF2细胞的迁移细胞数明显少于AGS-sictrl细胞( =0.002)。xCELLigence系统检测结果显示,从3 h开始,AGS-siTRAF2细胞的细胞指数低于AGS-sictrl细胞。Transwell实验检测结果显示,培养24 h,AGS-sictrl的细胞数为(109.3±3.1)个,AGS-siTRAF2的细胞数为(79.0±6.2)个,AGS-siTRAF2细胞的穿膜细胞数明显少于AGS-sictrl细胞( =0.002)。Western blot检测结果显示,AGS-siTRAF2细胞中RelA、RelB、p50和p52表达水平均明显低于AGS-sictrl细胞。TransAM检测结果显示,AGS-siTRAF2细胞中RelA、RelB、p50和p52的活性分别为0.01±0.00、0.01±0.01、0.92±0.01和0.53±0.03,均低于AGS-sictrl细胞(均 <0.001)。100例胃癌组织中TRAF2高表达率为53.0%,高于癌旁组织(38.0%),差异有统计学意义( =0.033)。在管状腺癌、分化程度低、T分期高、N分期高及TNM分期高的胃癌组织中TRAF2高表达率更高(均 <0.05)。TRAF2高表达组和低表达组患者的中位生存时间分别为17和78个月,差异有统计学意义( =0.010)。 结论 TRAF2低表达能显著抑制胃癌AGS细胞的生长、迁移和侵袭能力。胃癌组织中TRAF2的表达增高,TRAF2的表达与胃癌的预后有关。
来源:2019年第11期
《中华肿瘤》期刊编辑部